有机酸血症.pptVIP

* * * * * 串联质谱检测指标 名称 缩写 丙氨酸 Alanine Ala 精氨酸 Arginine Arg 瓜氨酸 Citrulline Cit 鸟氨酸 Ornithine Orn 苯丙氨酸 Phenylalanine Phe 酪氨酸 Tyrosine Tyr 甘氨酸 Glycine Gly 亮氨酸 Leucine Leu 甲硫氨酸 Methionine Met 缬氨酸 Valine Val 脯氨酸 Proline Pro 串联质谱检测指标 名称 缩写 名称 缩写 名称 缩写 游离肉碱C C0 己酰肉碱 C6 肉豆蔻二烯酰肉碱 C14:2 乙酰肉碱 C2 己二酰肉碱 C6DC 3-羟基肉豆蔻酰肉碱 C14-OH 丙酰肉碱 C3 辛酰肉碱 C8 棕榈酰肉碱 C16 丙二酰肉碱 C3DC 辛烯酰肉碱 C8:1 棕榈烯酰肉碱 C16:1 丁酰肉碱 C4 辛二烯酰肉碱 C8:2 3-羟基棕榈烯酰肉碱 C16:1-OH 3-羟基丁酰肉碱 C4-OH 葵酰肉碱 C10 3-羟基棕榈酰肉碱 C16-OH 异戊酰肉碱 C5 葵烯酰肉碱 C10:1 十八碳酰肉碱 C18 异戊烯酰肉碱 C5:1 葵二烯酰肉碱 C10:2 十八碳烯酰肉碱 C18:1 3-羟基异戊酰肉碱 C5-OH 月桂酰肉碱 C12 3-羟基十八碳烯酰肉碱 C18:1-OH 戊二酰肉碱 C5DC 肉豆蔻酰肉碱 C14 3-羟基十八碳酰肉碱 C18-OH 肉豆蔻烯酰肉碱 C14:1 高苯丙氨酸血症 中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 游离肉碱及酰基肉碱 有机酸血症相关： C0、C2、C3、3DC、C4、C4-OH、C5、C5-OH、C5DC、C5:1 脂肪酸代谢病有关： C0、C4、C5DC、C6、C8、C10、C12、C14、C14:1、C16、C16-OH、C18、C18-OH 标本前处理方式 衍生化标本前处理方法 样品处理过程中加入盐酸正丁醇，引入丁基 改变分子结构（除去羧酸功能团），消除潜在负离子，提高正离子模式下的离子化效率 酯化作用可以减少潜在的溶剂或其他干扰物质 降低分析物极性—更好的去溶剂化，样品更加容易进入仪器真空环境 酯化作用可以引入测量酰基肉碱和氨基酸方式（游离酸形式）无法检测到的干扰物 非衍生化标本前处理方法 无需使用盐酸正丁醇，使用甲醇萃取后可直接进样 整个样本预处理步骤仅需半小时， 琥珀酰丙酮的测试无需单独处理 具有扩展性：类固醇疾病、维生素缺乏等多种临床疾病 二羧酸酰基肉碱或氨基酸可能有两个负电荷位置，影响正离子效率 （分子的pKa值、流动相的pH值） 非衍生化法为应用趋势 操作繁琐(3h) 过程难以标准化 对环境和人员有害 需要氮吹设备 衍生化法 非衍生化法 操作步骤简单(40min) 易于标准化 不涉及酸腐、有毒物 扩展性好 发达国家的遗传代谢病筛查已从传统衍生化法逐步转为非衍生化法（近5年美国12.20%→46.84%） 标本前处理方法比较 衍生化 实验步骤长 实验过程2.5小时左右 需要氮吹设备 丁醇盐酸具有强烈腐蚀性 对实验室环境要求高 实验人员需防护 试剂相对便宜 非衍生化 简化实验过程 实验过程1小时 无需氮吹及衍生化过程 环境好 人员无需特殊防护 试剂价格相对贵 美国CDC统计 年度 N 荧光法 比例% MS（N） MS% 非衍/衍生% 衍生化 非衍生化 2009 2181 351 16.1 756 384 52.2 50.8 2010 2141 351 16.3 995 355 63.1 35.7 2011 2502 368 14.7 1116 622 69.5 55.7 2012 2483 354 14.2 1086 667 70.6 61.4 2013 2630 510 19.4% 1065 804 71.1 75.5 Phe测定标本数为例 检测指标选择 不同酶缺陷引起不同代谢途径差异 引起特定指标升高或降低 氨基酸代谢病可有一种或数种氨基酸水平异常 有机酸血症或脂肪酸氧化代谢病可有一种或数种酰基肉碱水平异常 一种指标异常可提示一种或几种代谢病 一种疾病也可对应多种指标异常 计算不同氨基酸或酰基肉碱之间的比值，有助于不同疾病之间的鉴别，降低假阳性率或假阴性率。 一个指标对应一种疾病 疾病 指标 丙二酸血症 C3DC 戊二酸血症I型 C5DC 精氨酸血症 ARG 酪氨酸血症 TYR 多个指标对应一种疾病：主要指标 疾病 指标 苯酮尿症 PHE，TYR，PHE/TYR 枫糖尿症 LEU/ILE，VAL 戊二酸血症第II型 C4，C5，C8，C8:1，C10，C12，C14，C16 极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 C14:1， C14 ,C16， 中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 C6，