载锌沸石对蛋鸡抗氧化及免疫功能的影响.docVIP

试验研究 试验一 载锌沸石对蛋鸡生产性能、血清指标、激素水平及肠道菌群 的影响 自上世纪五十年代以来，饲用抗生素的滥用给畜牧业带来了很大的困扰，越来越多的国家开始全面禁止饲用抗生素的使用，因此寻求一种高效、适用的新型锌源替代抗生素已经势在必行。锌作为动物机体生长发育所必需的微量元素，在免疫器官发育、细胞免疫、体液免疫和黏膜免疫等方面具有重要作用 [1]。锌参与蛋鸡体内生理机能的调节，可改善蛋鸡的生理状况，抑制肠道有害菌增殖、提高产蛋性能、增强繁殖机能等[2-4]。目前，饲料中常用的锌源以硫酸锌、氧化锌等无机锌为主，但无机锌易受潮、利用率低；近年来有研究报道，氨基酸锌等有机锌相对于无极锌有较高的生物利用率[5]，而有机锌生产成本高，不便保存；载锌沸石作为一种新型锌源[6]，目前主要以肉鸡为研究对象，在蛋鸡上的研究未见报道。本试验将载锌沸石添加于蛋鸡饲料中，替代饲料中的硫酸锌和杆菌肽锌，研究其对蛋鸡生产性能、血清指标、激素水平及肠道菌群的影响，以期为载锌沸石可成为一种新型锌源及可替代抗生素提供参考依据。 1 材料与方法 1.1载锌沸石的制备及锌含量的测定 试验所用沸石由镇江丹徒茅山沸石有限公司提供，粉碎后全部通过200目筛。分析纯氯化锌由南京化学试剂有限公司提供。载锌沸石的制备采用离子交换法[7]，具体操作为：称取经高温活化（350 ℃，2 h）的沸石，按固液比1︰1060 ℃的条件下，与ZnCl2溶液作用4 h。然后将混合液离心分离，分离出的固体样品用去离子水洗去未加载的Zn2+，指示剂滴定无沉淀生成后干燥后粉碎备用。 采用湿热消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定载锌沸石中锌含量，测得载锌沸石中的锌离子含量为1.75%。 1.2 试验动物与饲养管理 选用648只31周龄健康海兰褐蛋鸡随机分为6组，每组设6个重复，每个重复18只鸡，对照组（CON）饲喂基础日粮中添加ZnSO4的对照日粮（锌添加量为80 mg./kg），基础日粮锌实测含量为28 mg/kg，抗生素组(ANT)在上述对照日粮中添加40 mg/kg杆菌肽锌，试验1、2、3、4组分别在基础日粮中添加0.11%、0.23%、0.34%、0.46%载锌沸石（锌含量分别为20、40、60、80 mg/kg），各组日粮锌实测值见表1-1，ZnSO4、载锌沸石在预混料中添加，充分混合均匀。 试验蛋鸡采用3层阶梯笼饲养，乳头式饮水器自由饮水，每天16h连续光照，免疫程序按鸡场常规进行，每日早、晚两次喂料，12:30集蛋、称蛋重，记录产蛋重、产蛋数和软破蛋数，每周称一次余料。饲养试验在连云港通会养殖有限公司进行，为期63 d，第一周为预试期，之后为正试期。基础日粮配方及营养水平见表1-2。 表1-1 各组日粮锌实测值 Table 1-1 Zinc measured values of each dietary 组别 Group 锌实测值 Zinc measured values,mg/kg 对照组 CON 98.61 抗生素组 ANT 98.73 0.11%载锌沸石组 0.11%ZnBZ 44.86 0.23%载锌沸石组 0.23%ZnBZ 61.35 0.34%载锌沸石组 0.34%ZnBZ 81.58 0.46%载锌沸石组 0.46%ZnBZ 100.32 原料 Ingredients 含量 Content，% 营养水平 Nutrient levels2 玉米 Corn 60 代谢能ME，MJ/kg 10.97 豆粕 Soybean meal 26.2 粗蛋白CP，% 16.5 豆油 Soybean oil 0.8 钙Ca，% 3.52 石粉 Limestone 8 总磷TP，% 0.63 5%预混料5%Premix1 5 合计 Total 100 15%预混料由南京华牧动物科技研究所提供. 2计算值。Calculated values. 1.4 指标测定及方法 1.4.1 生产性能测定 根据统计的余料重、产蛋总数、总蛋重、软破蛋个数计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量、料蛋比及软破蛋率。 1.4.2 血清激素水平的测定 试验第4周测定血清促乳素(PRL)、雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、胰岛素（Ins），所用试剂由北京福瑞生物工程有限公司提供。 1.4.3 血清生化指标的测定 指标用全自动生化分析仪（Wasson, Wasson1600）测定，血清球蛋白（GLB）为血清总蛋白和白蛋白含量的差值，测定中所用试剂盒均由北方生物技术有限公司提供。 1.4.4 肠道菌群的测定 试验第8周时，各处理每重复随机选1只鸡，打开腹腔，无菌取盲肠食糜，取0.2g左右食糜于无菌离心管中，加入5 mL无菌生理盐水，用漩