壮骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响.docVIP

壮骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响 　　[摘要] 目的 探讨壮骨颗粒对原发性骨质疏松症的作用机制，为壮骨颗粒治疗骨质疏松症提供实验依据。 方法 建立6个月龄雌性SD大鼠卵巢摘除骨质疏松模型，模型成立后随机分为A组（假手术对照组）、B组（去卵巢对照组）、C组（钙尔奇-D组）、D组（壮骨颗粒组），A、B组喂服生理盐水、C组喂服钙尔奇-D、D组喂服壮骨颗粒。喂药12周后处死取材，检测大鼠离体股骨骨密度和血清钙、磷、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）、雌二醇（E2）等的浓度。 结果 A组大鼠毛皮颜色光泽，饮食、活动均正常；B组大鼠毛皮颜色无光泽，饮食量减少，活动次数降低，体重高于A组（P0.05）；B组血清BGP测定结果显著高于A组（P0.05）；C、D组血清ALP较A组明显升高（P0.01）。 结论 壮骨颗粒可以提高骨质疏松大鼠的骨密度及BGP、E2水平，增强成骨细胞活性，促进骨形成，抑制骨吸收。 　　[关键词] 骨质疏松症；骨密度；壮骨颗粒 　　[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）02（c）-0008-04 　　骨质疏松症是老年常见病，多与老年人体重、体脂及体内激素有关，是由于较少的骨矿含量、骨小梁数量，再加上骨组织显微结构衰退引起的，易导致骨折，属于全身性骨病[1]。据相关资料显示，有15%的50岁城市骨质疏松症老年妇女出现椎体压缩骨折，20%的70岁以上老年人出现不同程度的椎体压缩性骨折[2-3]。现代医学主要从抑制骨吸收和促进骨形成两方面进行治疗，虽然有一定疗效，但存在着价格昂贵、副作用较大等弊端[4]。本文从中医理论出发，结合现代医学知识，在对骨质疏松症病机再认识的基础上，提出补肾健脾活血法，创制了壮骨颗粒，从动物实验方面进行初步研究。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物与分组 　　6个月龄雌性SD大鼠40只，体重（210±20） g，由西安交通大学动物实验中心提供。随机将40只大鼠分为4组，各10只，分别为A组（假手术对照组）、B组（去卵巢对照组）、C组（钙尔奇-D组）、D组（壮骨颗粒组）。大鼠饲养在清洁级屏障系统动物房里，定期清洁，定时通风，保持干燥，饲养房保持安静，室温维持在18～25℃，湿度40%～70%，饲养条件一致。 　　1.2 药品 　　壮骨颗粒（由淫羊藿、补骨脂、山茱萸、党参等组成）由青岛中医医院制剂室提供；钙尔奇-D颗粒由江苏惠氏药业有限责任公司生产，生产批号：国药准字号第。采用青霉素钠（华北制药股份有限公司，国药准字注射，800 000 U/瓶。 　　1.3 试剂与仪器 　　由北京中生生物工程高科技术公司提供钙、磷、碱性磷酸酶（ALP）试剂。由北京北免东雅生物技术研究所提供血清雌二醇（E2）、骨钙素（BGP）试剂盒。主要实验器材有XD811生化分析仪，FT.613型自动计算125I放免测量仪，721分光光度计，DPX.I Q型双能X线骨密度仪。 　　1.4 模型建立 　　所有大鼠用10%水合氯醛（350 mg/kg，腹腔麻醉），全麻后，腹位固定大鼠，B、C、D组取脊柱旁两侧肋脊角纵向切口摘除双侧卵巢，A组大鼠将卵巢周围脂肪部分切除，逐层缝合切口。大鼠术后采取青霉素进行肌内注射，200 000 U/次，2次/d，共3 d，将大鼠隔离分别放置笼子中，1周后拆线。每组大鼠在饮水、吃食时均在相同条件下。术后7 d，C组灌胃钙尔奇-D 1.5 g/（kg·d），D组灌胃壮骨颗粒2 g/（kg·d），A、B组灌胃等体积生理盐水2 ml/（kg·d）。 　　1.5 取样 　　连续给药12周，称重后停药取样，采取摘除眼球方法，取5 ml血液，3000 r/min离心15 min，分离血清，将其保存在抗凝管中，放置于-20℃环境下保存。选取大鼠双侧股骨，将股骨表面上的软组织和软骨去除，用生理盐水浸湿的纱布包裹做好标记备用。 　　1.6 观测指标及方法[5] 　　1.6.1 一般状况观察 定期每天对大鼠毛色、饮食及活动情况进行详细观察并记录；每周称量一次体重。 　　1.6.2 血生化指标 采用终点法对大鼠的血清钙、血清磷水平进行检测；采用动态法对大鼠血清ALP水平进行检测；采用放射免疫法对血清BGP、E2水平进行检测。 　　1.6.3 骨矿密度（BMI） 测定双侧股骨骨密度可采用Lunar公司生产的双能X线骨密度仪，骨密度值采用单位面积内的骨矿物质含量表示（g/cm2）。 　　1.7 统计学分析 　　应用SPSS 18.0统计学软件处理数据，数据用x±s表示，采用q检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 4组大鼠术后12周一般情况的比较