人参皂苷对亚急性衰老小鼠的认知能力及脑组织MDA含量的影响.docVIP

人参皂苷对亚急性衰老小鼠的认知能力及脑组织MDA含量的影响 　　【摘要】目的探讨人参皂苷（GS）对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化的作用。方法GS分三个剂量组即：4mg/（kg?d），20mg/（kg?d），100mg/（kg?d）给小鼠灌胃，模型组和空白组为生理盐水灌胃；除空白组外，其他组每天颈背部皮下注射D-半乳糖制备亚急性衰老模型；连续灌胃和注射42d。观察小鼠的基本生命体征，Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力，比色法测定小鼠全脑组织中的丙二醛（MDA）含量。结果与空白组比较，模型组小鼠空间学习记忆能力下降，GS灌胃中、高剂量组明显好于模型组；与空白组比较，模型组小鼠全脑组织MDA含量明显增加；与模型组比较，GS20mg/（kg?d）和100mg/（kg?d）可减少MDA含量。结论人参皂苷对D-半乳糖致衰老模型小鼠的认知能力减退具有改善效果，可能与其增加衰老小鼠的抗氧化能力有关。 　　【关键词】人参皂苷；衰老；认知能力；D-半乳糖 　　根据全国老龄委的统计值估算，2013年老年人数量将达到2.02亿，老龄化水平将达到14.8%。解决诸多老龄化问题的基础，就是生理上延缓衰老。人参用于抗衰老的历史可追溯至我国第一部药学专著《神农本草经》，上千年的临床用药实践不断证明了其“开心益智，久服轻身延年”效果[1]。但是脑老化可能为脑细胞凋亡、神经递质紊乱、衰老基因表达、氧自由基损伤等多种内外因素所致，人参通过何种方式延缓脑老化尚且有待进一步研究。 　　本实验先证实了人参皂苷（GS）对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠[2]脑组织的保护作用，然后通过检测脑组织中脂质过氧化物丙二醛的含量变化，以探讨人参的抗氧化能力与其抗脑老化的作用间的联系。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1动物清洁级昆明种小鼠，雌性，体重（21±3）g，由中南大学湘雅医学院实验动物学部提供，在长沙医学院湖南省重点建设学科标准动物室饲养。 　　1.1.2试剂人参皂苷（GS），含量≥80%UV，购自吉林省宏久生物科技公司。D一半乳糖购自国药集团。考马斯亮兰蛋白测定试剂盒和丙二醛（MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；其他化学试剂均为分析纯。 　　1.1.3仪器Morris水迷宫，西班牙Panlab公司生产。722型分光光度计，产自上海光谱仪器有限公司。 　　1.2方法 　　1.2.1实验动物分组及给药将30只小鼠适应性喂养一周后随机分为5组：空白对照组，亚急性衰老模型组，GS4mg/（kg?d）（低剂量）组，GS20mg/（kg?d）（中剂量）组，100mg/（kg?d）（高剂量）组。每组6只，自由摄食和饮水。每天称重，实验组按体重灌胃GS，空白对照组和衰老模型组按照5ml/（kg?d）生理盐水灌胃。除空白组外，其他组每天颈背部皮下注射D-半乳糖1000mg/kg.bw制备亚急性衰老小鼠模型，空白组注射同剂量的生理盐水，连续灌胃和注射42d后检测小鼠的学习记忆能力，处死小鼠，测定各项生化指标。 　　1.2.2Morris水迷宫测试[3]①定位航行实验：加药第38天开始训练4天，每天上、下午各一轮，即将小鼠从Morris水迷宫四个象限入水点面向池壁放入水中，记录小鼠寻找到透明有机玻璃平台的时间（逃避潜伏期）；超过2min未找到平台，引导其至平台上站立15s。第5天（加药第42天）检测逃避潜伏期，超过2min未找到平台，潜伏期记为120s。②空间探索实验：第5天（加药第42天）撤除平台，然后将小鼠任选一个入水点放入水中，测其120s内跨原平台所在位置的次数（跨平台次数）。 　　1.3统计学方法采用SPSS19.0软件进行数据分析处理，数据以χ±s表示。多组间先用单因素方差分析，组间比较方法采用t检验，P0.05有统计学意义。 　　2结果 　　2.1GS对小鼠表现状态影响与空白对照组相比，模型组、GS各剂量组小鼠的饮食情况、大小便情况、毛发状态和精神状态均无异常，体重总体呈现增加趋势，与空白对照无显著差异，以此证明D-半乳糖致衰老过程中，对小鼠的体质并无明显影响。 　　2.3GS对衰老小鼠脑组织中MDA含量的影响由表1可知，衰老模型组小鼠的脑组织MDA含量则显著高于空白组（t=2.84，P0.05），提示衰老模型小鼠脑组织抗氧化能力下降。与模型组相比，GS中剂量组和高剂量组MDA含量降低（t=2.27，P0.05）（t=2.609，P0.05），具有统计学意义。GS低剂量组的MDA含量与模型组相比，差别无统计学意义。 　　3讨论 　　近代研究认为，脑衰老是机体各种生化反应的综合表现，是体内外许多因素（环境污染、精神紧张、遗传等）共同作用的结果。关于衰老的学说有很多种，例如氧自由基学说、大脑衰老中心学说、免疫功能下降学说等。