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第2章 生命执行者-蛋白质 Questions: 为什么每一种生物的外观形态都有差异? 为什么动物可以运动? 为什么食物能在较低的温度(体温)下被很快消化? 为什么人的体温超过40?C就难以忍受? 为什么说AIDS病是一种可怕的病症? 科学家将蜘蛛基因植入羊体 羊奶产丝可制防弹衣 蛋白质种类 本章主要内容 2.1 氨基酸 2.2 肽 2.3 蛋白质 2.4 蛋白质的结构 2.5 蛋白质的功能 2.6 蛋白质的分离纯化 2.7 蛋白质药物研究 蛋 白 质 简 介 氨基酸 多肽 蛋白质 Amino Acid Polypeptide Protein 凯式定氮法: 蛋白质的含量 = 样品中含氮量 ? 6.25(p28) (蛋白质平均含氮量16%) 氨 基 酸 课堂小练习 构成生命体和维持生命现象的基本物质(4种生物大分子): 两性离子状态α-氨基酸的结构通式 构成天然蛋白质的氨基酸有几种。 20种氨基酸都是 L- α-氨基酸。 除甘氨酸外,天然存在的氨基酸都是L-型氨基酸。 天然蛋白水解得到的氨基酸是L-氨基酸。 为什么不法商家在牛奶中掺入三聚氰胺? 氨基酸的解离性质 解离常数与等电点 中性氨基酸: pI = ( pK1 + pK2 ) / 2 酸性氨基酸: pI = ( pK1 + pKRCOO- ) / 2 碱性氨基酸: pI = ( pK2 + pKRNH2 ) / 2 等电点:pI pK1 : ?—C上COOH解离常数负对数 pK2 : ?—C上NH3+解离常数负对数 pKRCOO- : 酸性侧链的解离常数负对数 pKRNH2 : 碱性侧链的解离常数负对数 组 氨 酸 2.1.4 氨基酸的特征化学反应 1. 与亚硝酸反应 2. 与茚三酮反应 3. 与2,4-二硝基氟苯、丹磺酰氯、苯异硫氰酸酯的反应 4. 侧链参与的反应 2.与茚三酮反应:?-氨基和羧基共同参与 4. 侧链参与的反应 周四报告 1. 氨基酸与健康 2. 蛋白质的变性与复性 3. 蛋白折叠与疾病(举例说明) 课 后 小 结 20种基本氨基酸:6 3 2 2 3 2 2 PI定义及计算公式 PH/=/PI时,AA的带电情况及电场中移动情况 3种碱性氨基酸和2种酸性氨基酸的PI 3种芳香族AA的紫外吸收 ?-NH2的特色反应特点 8种人体必需氨基酸 1. 酸性和碱性氨基酸的pI计算: 1)精氨酸的pK1=2.17, pK2=9.04, pK3=12.48(胍基),其pI=( ); 2)天冬氨酸的pK1=2.09(羧基), pK2=9.82,pK3=3.86 (羧基),其pI=( )。 2.判断: 1)处于等电点的氨基酸溶解度最小 。 2)溶液的pH值可以影响氨基酸的pI值。 3) 氨基酸的甲醛滴定可用来直接测定氨基酸的浓度。 咪唑基: 1. pKR = 6.0 在生理条件下具有缓冲作用 2. 质子的给体与受体 酶的催化作用具有重要意义 D10 H20 K76 D8 -OOC—CH2—NH2 HCHO -OOC—CH2—NHCH2OH HCHO -OOC—CH2—N(CH2OH)2 N,N – 二羟甲基甘氨酸 酚酞指示剂 NaOH 直接测定氨基酸的浓度 甘氨酸的甲醛滴定 氨基酸的甲醛滴定 氨基酸的紫外吸收性质 ?max=275nm ?max=257nm ?max=280nm ?max=280nm ?max=275nm ?max=257nm 色氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸 芳香族氨基酸在pH8时紫外吸收光谱 Van Slyke method for determination of amino acid content: nitrous acid reacts with a-amide group 1. 范斯来克法----与亚硝酸反应 N2一半来自氨基酸,另一半来自亚硝酸 定量测定氨基酸的量 ?-NH2:3-4分钟反应完全 定性、定量 与茚三酮的反应(Ninhydrin) 兰紫色 (脯氨酸:黄色) 3. 与2,4-二硝基氟苯、丹磺酰氯、苯异硫氰酸酯的反应 1)与2,4-二硝基氟苯(DNFB)(Sanger试剂)反应: 二硝基苯基氨基酸(DNP-氨基酸) 黄色 与氨基酸氨基(蛋白质和多肽的N端氨基酸残基)的反应 2)与丹磺酰氯(DNS-Cl)反应:
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