培训课件--第六章ENA多肽抗体谱免疫印迹检测.pptVIP

第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 三、抗Scl-70抗体 1、抗Scl-70抗体中的Scl Sclerosis的缩写 70代表抗原分子量，为70KD（70000） 2、是弥漫型硬皮病 PSS 的标记抗体。 3、阳性率可达50-64% 4、在86 KD和70KD两区带间有时可见到 两条较弱的区带，是100KD的降解产 物。 两区带一般同时出现。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 四、抗SSA抗体（抗RO抗体） 1．SS为干燥综合症（Sjogren’s syndrome） 的缩写。A为抗原子序列号 2．曾以最先查到此抗体患者名字命名，又称 抗RO抗体。 3．对干燥综合症（SS）诊断有意义。阳性率 70~80% 合并SLE 30~50% 单纯SLE 8~10% 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 四、抗SSA抗体（抗RO抗体） 4．可见于其它多种自身免疫性疾病。 包括SLE，硬皮症，多发性肌炎和类风湿关节炎等疾病。 5、 该抗体阳性也可引起亚急性皮肤狼疮的皮损与SLE的广泛光过敏性皮炎也相关，IgG类抗SSA抗体通过胎盘进入胎儿后可引起新生儿狼疮综合症。 6、 个别因抗体与心脏的传导系统相结合可造成先天性心脏传导阻滞。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 五、抗SSB抗体 1．抗SSB抗体常伴随抗SSA抗体同时出现。 2．抗SSB和抗SSA抗体并存，对诊断SS（干 燥 综合症）有特异性。 3．48KD、47KD、45KD三区常不仅同时出 现，也与52KD区带同时出现， 但48/47KD有时很弱，不易分辨。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 六、抗JO-1抗体 1．是Pm/Dm（肌炎/皮肌炎）公认的标记抗 体，阳性率25~40%。 2．主要见于多发性肌炎（Pm）在皮肌炎 （Dm）中阳性率较低。 3．抗JO-1抗体 该抗体阳性患者常会同时出现肌炎，肺部间质性病变的关节炎等症状。易被临床误诊为慢性肺部感染或类风湿关节炎。 4．确定55KD需要慎重，因为临床意义不明为54、56KD和55KD在位置上相差不到1毫米。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 临床意义 七、抗Rib抗体（抗核糖体抗体） 1．抗Rib抗体又称抗核糖体抗体（rRNP） （抗rRNP抗体） 2．主要见于SLE，是SLE的另一血清学标记抗 体。 阳性率20~30% 该抗体阳性与SLE的中枢神经系统病变相 关。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 黑龙江中医药大学 临床医学院 诊断教研室 黄 萍 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 第一节 概述 一、 何为ENA ENA Extractable nuclear antige 盐水可提取性核抗原的总称。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 核抗原： 组蛋白 ： 不溶于水 DNA ； 不溶于水 ENA： 可溶于生理盐水 是非组蛋白核蛋白，属酸性核蛋白抗原，是许多小分子量的RNA和多肽组成。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 二、多肽抗体谱 ENA抗体是指能与核中盐水可提取抗原发生特异性结合抗体，既是抗核抗体的一部分。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 ENA多肽抗体谱 是由许多小分子量的RNA和多肽组成。 不同的uRNA各有其相应的抗体。目前发现的相应的抗体已有十余种，其中，国际上共认的对风湿有特异的诊断价值的有七种。故将这七种抗体叫做多肽抗体谱 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 三、 免疫印迹 免疫印迹（Immunoblot IBT） 又称免疫转印技术。是一项新的生化技术。它对研究工作的影响与内切酶的发现和 PCR的基因扩增技术是等量齐观的。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 免疫印迹的基本原理： 将凝胶电泳与固相免疫结合起来，其主要的操作过程分三个步骤。 1、分离 盐水可提取抗原（ENA）中多 肽按分子量的大小，先用SDS— 聚丙烯酰胺凝胶分离 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 免疫印迹的基本原理： 2 、转移 将分离的组份从凝胶上转移到固相基质上，如硝酸纤维膜 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 免疫印迹的基本原理： 3 、测定 对转移后的组份进行免疫法测定，显示出蛋白带。 既通过抗体的反应，用酶联免疫吸附法观察与抗体反应的多肽（呈显色带）的数量与分子量 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 免疫印迹的基本原理： 免疫转印技术实际上是一项将凝胶电泳技术、固定化技术及分子亲和技术三者融为一体的免疫转印技术。 第六章???ENA多肽抗体谱免疫印迹检测 免疫转印技术优