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血小板功能检测其临床应用.doc
血小板功能检测及其临床应用【关键词】? 血小板; 功能检测; 临床应用
血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。虽则有些方法能应用于多种检测目的,但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。故在检测时应合理地运用。
1 出血性疾病监测中的应用
血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类,在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。
1.1 遗传性血小板功能异常疾病
黏附受体蛋白异常:GPIbⅨ(BSS,血小板型vWD,BolinJamieson 综合征)、GPb/Ⅲa(血小板无力症)、GPa/Ⅱa、GP、GP。
可溶性激动剂受体异常:TXA2受体,P2Y12受体、α2肾上腺素能受体。
血小板颗粒异常:δ颗粒(δ贮存池缺陷、HermanskyPudlak综合征等)、α颗粒 (灰色血小板综合征,Quebec血小板病等)。
信号传递途径异常:TXA2途径异常、Ca离子流动异常、Gαq缺陷、GSα高反应、PLCpleckstrin磷酰化缺陷。
膜磷脂异常:Scott综合征、Stormorken综合征。
其他异常:原发性释放异常、Montreal综合征、EhlersDanlos综合征、 MayHegglin综合征等
1.2 遗传性血小板数量减少疾病
体积减小:WiskottAldrich综合征、性联血小板减少症。
体积正常:家族性血小板病、先天性无巨核细胞性血小板减少症。
体积增大:巨大血小板综合征、血小板型vWD、MayHaegglin异常、灰色血小板综合征、Montreal血小板综合征。
1.3 获得性血小板功能异常 这种异常十分常见,可由下列不同原因引起: 药物、食物和维生素; 慢性肾衰; 体外循环; 骨髓增生异常疾病; 抗血小板抗体等。
血小板功能缺陷检测的方法包括: 血细胞分析仪在测定血小板数量及外形大小中应用; 血小板功能:出血时间(血小板功能分析仪,(FPA100R)、 黏附性测定、 聚集功能测定、 释放功能测定(致密颗粒:5HT、ADP、ATP、δ颗粒缺陷HermanskyPudlak 综合征、ChediakHygashi 综合征(荧光法)、α颗粒:TF4、βTG(α颗粒缺陷灰色血小板综合征、Quebec 血小板病、Jacobsen或ParisTrousseau 综合征)(ELISA法,试剂盒),PF3有效性; Ca2+释放与内流,、血栓烷形成、cAMP、GAMP;血块回缩; 膜受体分析采用流式细胞术和电泳术(黏附受体GPb/Ⅲa、GPb,激动剂受体P2Y12、GP);④ 基因分析采用分子生物技术; 其他(超微结构)。
上述检测方法目前巳成为疾病诊断的基本手段,但随着对疾病的病理机制的深入研究以及包括血小板信息传递在疾病中的新的认识,许多蛋白分析技术巳逐渐成为研究方法中的一部分,但它们的应用可能仅限于研究目的而言,而不适合一般医院的临床检测应用。
血小板体积测定不仅能反映血小板生成及衰老,而且在鉴别遗传性血小板疾病中也是一项十分有用的指标。在巨大血小板综合征中的巨大血小板在末梢血涂片可达80%,其直径达到20 μm以上。必威体育精装版也有报道非巨大血小板综合征而血小板体积明显增大数量减少病因不清的遗传性巨大血小板减少症。体内出血时间结合血小板数曾是血小板数量与质量异常所致出血的筛选试验,但由于出血时间存在种种不足而被弃之不用。血小板黏附性所测得的结果是血小板聚集和黏附的总和,不能独立反映黏附功能也被弁之。
PFA100TM是一种模拟体内初期止血的测定仪,又名“外出血时间”,结果以血小板闭塞网眼停止血液流动的“闭合时间”表示。故可以检测与血小板黏附、聚集、栓子形成的初期止血障碍相关的疾病,血栓性疾病、GPb/Ⅲa拮抗剂等抗血小板药物监测、血小板贮存、血管性血友病及DDAVP治疗、肝肾功能疾病等。与出血时间试验相比,在诊断vWD中的敏感性90%。由于此项检测所需费用较高,限制了其广泛应用。
血小板聚集性测定是被应用最广泛、发展和改进最多的一项测定。至今为止,巳发展而成的血小板聚集仪包括有比浊法、阻抗法(全血血小板聚集仪)、光散射法和Verify Now分析仪(Ultegra快速血小板功能分析仪)。在测定血小板聚集的仪器中,设计有可以同步测定血小板腺核苷酸释放和血小板胞浆Ca2+浓度的装置,具有多功能性。
比浊法最常用,诱导剂通常为ADP、胶原、花生四烯酸和瑞斯托酶素等4种。但存在标本分离、制备、诱导剂种类与浓度选择、正常值设定等影响因素,缺乏各实验室之间的可比性。在一项误差分析中
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