白前苷B对肝损伤保护作用及机理研究..pptVIP

目 录 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—小结 本实验根据文献报道及细胞凋亡相关机理，选用线粒体膜电位、钙离子浓度及氧化应激相关指标检测，确定GCDC诱导L-02肝细胞凋亡最佳浓度为100μmol/L。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 3、Hoechst 33258染色检测对细胞凋亡的保护 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 Ca2+被认为与细胞凋亡诱导和抑制的信号转导通路有关。随着GCDC给药量增加，细胞内Ca2+浓度逐渐增加，细胞凋亡增加。 注：与空白对照组比较：**P0.01。 5、细胞内钙离子浓度变化 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 6、细胞内ROS变化 注：与空白对照组比较：* p0.05, ** P0.01。 ROS产物的增多检测是细胞氧化应激反应的重要指标，随着GCDC给药量的增加，ROS释放量增加。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 7、细胞内GSH变化 注：与空白对照组比较：**P0.01。 随着GCDC的给药量增加，细胞内的GSH 有明显的降低。细胞内ROS升高，是造成细胞内GSH降低的原因之一 。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 1、白前苷B安全浓度范围 注：本实验中选择白前苷B的最大作用浓度为250μmol/L为 含有1%DMSO溶剂所能溶解的最大剂量。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 2、白前苷B对GCDC处理的肝细胞的存活率影响 注：与空白对照组比较：## P 0.01; 与GCDC组比较: * P0.05, **P0.01。 白前苷B对GCDC诱导的肝细胞存活率降低有保护作用，并且有剂量依赖性。 GCDC 100μM 注：与空白对照组比较：##P 0.01; 与GCDC组比较: * P0.05, **P0.01。 随着白前苷B的给药剂量增加，凋亡小体明显减少，细胞凋亡率降低，高浓度时与正常相似。说明白前苷B细胞凋亡有保护作用。 正常对照 GCDC 100μM 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 注：与空白对照组比较：##P 0.01; 与GCDC组比较: **P0.01。 4、白前苷B对细胞凋亡率的影响 随着白前苷B给药剂量增加，细胞凋亡（Q4区）明显减少，证明白前苷B对GCDC诱导的早期肝细胞凋亡有明显的保护作用。 注：图中以Annexin V为横轴，PI为纵轴；左上象限为机械性损伤细胞；右上为晚期凋亡细胞或者坏死细胞；左下为阴性正常细胞；右下为早期凋亡细胞。 GCDC 100μM 5、细胞线粒体膜电位 白前苷B对肝细胞凋亡的保护作用与线粒体途径相关。 6、白前苷B对细胞内钙离子浓度的影响 注：与空白对照组比较：##P 0.01; 与GCDC组比较: **P0.01。 GCDC 100μM 白前苷B给药组可以逆转GCDC诱导的细胞内Ca2+浓度升高。证明其保护肝细胞凋亡机理与调节细胞内Ca2+浓度相关。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 7、白前苷B肝细胞内ROS的影响 注：与空白对照组比较：##P 0.01; 与GCDC组比较: * P0.05， **P0.01。 说明白前苷B对GCDC造成的肝细胞凋亡有明显的保护作用，其保护作用机制与抗细胞氧化作用相关。 GCDC 100μM 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—结果 8、白前苷B对GCDC诱导细胞内GSH的影响 注：与空白对照组比较：##P 0.01; 与GCDC组比较: **P0.01。 GCDC 100μM GCDC可以产生细胞内氧化应激作用，使GSH 降低，对肝细胞造成损伤，而白前苷B 则对此产生保护作用。 综合上述ROS检测，充分证明白前苷B保护肝细胞凋亡作用机制与抗细胞氧化应激作用相关。 五、白前苷B对GCDC诱导人正常肝细L-02凋亡保护作用及机理研究—小结 本实