第二章食用菌三级菌种制作技术.pptVIP

第二章 食用菌制种技术 关于制种的几个概念 第一节 制种场地、设备、用具及消毒药品 第二节 三级菌种制作技术 本章重点 有关概念 菌种：由人工方法培育出来的纯双核菌丝体。 母种：由孢子或者组织分离而得到的最初菌种。 原种：将母种扩大到新培养基上培育出来的菌丝体。 栽培种：由原种再扩大接种一次培养而得。直接应用于生产。 消毒和灭菌。 第一节 制种场地、设备等 一、制种场地 二、常用设备 三、制种用具 四、消毒药品 一、制种场地 闲散房屋均可用。新建时选择场地要注意：交通方便，水电齐全，周围环境要卫生。 建造可参照 “Ｕ”字型房，以方便生产。包括：配料室、灭菌室、冷却室、接种室、菌种培养室、销售室以及库房等。 二、常用设备 （一）拌料和装料设备 （二）灭菌设备 （三）接种设备 （四）培养设备 （一）拌料和装料设备 拌料设备：可人工拌料，也可用拌料机，有桶式和开放式两种。 装料设备：人工装料或用装瓶装袋两用机。关键是料的松紧度，可3-5人合作，约1000袋/h。 （二）灭菌设备 根据灭菌压力：高压灭菌设备和常压灭菌设备。 高压灭菌特点：温度高，灭菌速度快，灭菌彻底，但每次灭菌量小，投资较大。 高压灭菌设备：①手提式高压灭菌锅。②立式高压灭菌锅。③卧式高压灭菌锅。 （三）接种设备 洁净工作台：适合接母种和少量原种。 接种箱：成本低，容量较大，适合各级菌种。 接种帐：适于接栽培袋，但效果稍差。 接种室：与接种帐类似。 电炉和蒸汽接种：简易，成功率80%以上。 （四）培养设备 培养室：要清洁卫生，有调温设备。可用于原种、栽培种培养，要做一些培养架，便于菌种检查和提高空间利用率。 电热恒温培养箱：温度可调，容积小。 三、制种用具 １、酒精灯； ２、托盘天平； ３、地泵； ４、水桶、盆、铝锅； ５、镊子； ６、接种钩和接种铲； ７、试管、菌种瓶和菌种袋； ８、漏斗； ９、电炉或煤炉； 另外，还需温度计、湿度计、量筒和量杯、磨口瓶、塑料绳、报纸以及pH试纸等。 四、消毒药品 1. 75%酒精 2. 40%甲醛＋高锰酸钾 3. 汽雾消毒剂 4. 高锰酸钾（0.1%-0.2%） 5. 5%石炭酸(苯酚) 6. 1%-2%来苏儿 7. 2%-5%漂白粉 8. 硫磺 各种药品最好轮换使用，以防产生抗药性。 第二节 三级菌种制作技术 一、母种制作技术 （一）母种培养基制备 （二）组织分离法 （三）母种的扩大 二、原种制作技术 （一）原种培养基的制备 （二）原种的制作 三、栽培种制作技术 （一）栽培种培养基制备 （二）栽培种的制作 四、菌种污染的原因及防止措施 一、母种制作技术 培养基的概念 常用的母种培养基配方 母种培养基的制作 1.培养基的概念 培养基是按照食用菌生长繁殖所需要的各种营养，用人工方法配制而成的营养基质。 2. 母种培养基配方(g/1000ml) 3.母种培养基的制作 PDA培养基的制作过程： 煮土豆，取滤液。开锅后，文火煮30min，适当搅拌，使营养充分溶出。 补足水，加药品溶化。琼脂溶解较慢并易溢锅，烧开后减小火力并搅拌1min左右。 （二）菌种组织分离法 组织分离的概念、种类和特点 组织分离的方法 1.组织分离的概念、种类和特点 概念：是指在双核菌丝的组织上切取一块组织，使其在培养基上萌发而获得纯双核菌丝体的方法。称作原始母种。 种类：据切取组织的来源，分为子实体组织分离、菌核、菌索组织分离和基内菌丝组织分离。 特点：简单易行；为无性繁殖。 2.平菇子实体组织分离方法 培养基制备。 种菇选择：是指用来进行组织分离的子实体。要选择适宜出菇期出菇早、出菇整齐、形态正常、无病虫害、产量高的栽培袋，从上选择肥大、肉厚、6成熟的幼嫩子实体，切去多余菌柄。 接种场地消毒。 （三）母种的扩大 培养基的制备（同前） 接种场地的消毒灭菌（同前） 母种的扩大 培养 3.母种的扩大 要严格无菌操作。母种试管表面消毒，然后靠近灯焰用接种钩将母种横切成若干份，再用接种铲将横切的母种分成2-3份，取一份带1～2mm厚的培养基放入新的培养基斜面上。 4.培 养 在适宜条件下培养。2-3天后，检查菌丝的生长及杂菌污染情况，若在接种块或培养基表面上出现独立的小菌落或奶油状小点，即为污染，应立即淘汰。 二、原种制作技术 （一）原种培养基的制备 （二）原种的制作 （一）原种培养基的制备1.常用原种培养基配方(%) 2.原种培养基制备 选定配方。分别称取各物质。 加水拌料。含水量约60%～65%，料水比约1:1.3～1.5。关键是拌匀，用量少的水溶性物质要先溶于水，再拌入料中。 （二）原种的制作 场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏0.5～2h。 接种：母种表面消毒后带入接