蛋白质与离和小分子相互作用的平衡渗析研究.pdfVIP

摘要 生物大分子是近年来生命科学研究的热点和难点之一，金属离子与蛋白质的作用是 很多领域都很重视的问题，人们在这方面也做出了很多有意义的成果。另外，对变性剂 使蛋白质变性的研究则有助于揭示生命现象的一些未解之谜。 本文根据Viker等人和Amos等人的渗析压装置示意图，成功地设计了平衡渗析装 上，我们将逐级稳定常数间存在的统计因子的差异考虑进去，从而得到了更为准确的结 果。 利用渗析平衡原理可以直接测定渗析平衡时变性剂在蛋白质分子上的结合数，这对 研究蛋白质变性的机理是十分有用的。本文运用平衡渗析法并结合量热数据研究了 相互作用，通过实验可以得到蛋白质在变性不同阶段与变性剂的平均结合数(v)，根据 蛋白质对有机小分子或有机离子的结合能，即Wyman束缚能(兀)，计算出每摩尔蛋白质 结合一摩尔变性剂的自由能变化(△瓯)的近似值，结合量热数据计算出每摩尔蛋白质 (V)是非常多的，已达到数千个，说明这两种变性剂除了开始与蛋白质的结合之外， 更多的则是在己结合的变性剂分子上的吸附。随着变性剂浓度的增加，蛋白质结合的变 性剂分子数增多，其过程基本分为三个阶段。本文在不同的pH值条件下，两种变性剂 对三种蛋白质在不同阶段的结合能力和变性能力进行了详细的说明，并讨论了结合的机 理问题。 关键词：蛋白质，铜离子，尿素，盐酸胍，平衡渗析 ABSTRACT Inrecent of macromoleculeshasbeenoneofthe anddifficultareas years，thestudybiological popular inlifescience．Theinteractionbetweenmetalionsand hascausedconcerllsin protein great fields， many andmuchvaluable hasbeen made．Theof denaturationisconducivetorevealthe progress Studyprotein mechanismof livingphenomenon． Inthis have the for experimental tO paper,wedesigned apparatusequilibriumdialysisaccording Viker’8osmometerand interactionofCu2+withBSAwas studiedthe Amos’osmometer．Firstly,the using in of mothodof tris-Hclbuffer 7．00．Itisindicatedthattherewereone equilibriumdialysis pH strong siteand weak sitesforCu2+in the constantsofthe eight BSA，and binding binding