血液中代谢啉的快速荧光检测方法.pdfVIP

摘要 摘要 人体血液中卟啉含量的测定对于卟啉症以及其它卟啉相关病症的诊断、环境 污染的监测等具有重要的意义。由于血液中主要存在的几种卟啉结构相似，荧光 光谱重叠，常规荧光分光光度法难以同时测定多种卟啉。同步荧光法具有简化谱 图、减少光散射、提高选择性等特点，适合于多组分混合物的分析。本论文致力 于发展简便快速，并能同时测定血液中多种卟啉的同步荧光分析方法，并结合导 数技术消除基体干扰。论文由以下三章组成： 第一章是文献综述。首先阐述了同步荧光法的发展及应用、可变角同步荧光 法和恒基体同步荧光法的理论基础及分析应用，以及导数技术的发展及特点。然 后介绍卟啉作为生物标志物的研究以及卟啉的分析方法。最后提出了本论文的研 究设想。 第二章提出简便快速、同时测定全血中原卟啉和锌原卟啉的导数可变角同步 荧光法。该方法一次扫描即可同时测定原卟啉和锌原卟啉，无需引入原卟啉的光 nmol／L 谱补偿因子和经过色谱柱分离。原卟啉和锌原卟啉的检测限分别为0．098 和0．088nmol／L。平行测定5等分同一份血液中的原卟啉和锌原卟啉，相对标准 偏差分别为4．1％和4．2％。对血样进行加标回收试验，原卟啉和锌原卟啉的平均 回收率分别为86．4％和72．9％。将所建立的导数可变角同步荧光法用于30份血 液样品的测定，测得的总原卟啉的含量与传统荧光法的测定结果相关性良好， Bland．Altman分析也证明两者一致，两种方法之间无显著性差异。 第三章提出联用导数可变角同步荧光法和恒基体同步荧光法的设想，并考察 了用于同时分析血液中尿卟啉、原卟啉和锌原卟啉的可行性。虽然尿卟啉和原卟 啉荧光光谱严重重叠，锌原卟啉对尿卟啉和原卟啉同时产生干扰，但是通过选择 合适的扫描路径，导数可变角一恒基体同步荧光法仅需一次扫描就可以分辨光谱 严重重叠的尿卟啉、原卟啉和锌原卟啉，消除了相互之间的光谱干扰。导数可变 角一恒基体同步荧光法有望成为分析血液中卟啉的新方法。 关键词：血液；代谢卟啉；同步荧光分析 ABSTRACT Thedeterminationoftheamountof inhuman bloodis forthe porphyrins important of andother related alsoforthe diagnosisporphyrias porphyrindiseases，and ofenvironmentalcontamination．Themolecularstructurethedominant monitoring of inbloodaresimilarwitheach the ofthese porphyrins other,therefore spectra isdifficulttodeterminethe porphyrinsoverlapmutually．R porpbyrinssimultaneously wimconventional methods．The characteristicsof spectrofluoromctric synchronous fluorescence arc spectrometryspec