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两种不同的渗透剂对髓过氧化物酶测定的比较分析.pdf
江西医学检验2001年6月第19卷第3期
两种不同的渗透剂对髓过氧化物酶测定的比较分析
巩又玉
中圈分类号R446．11+3，R446．62文献标识码A 文章编号1008枷23(2001)03_016l—02
在白血病免疫分型中，胞浆抗原的检测，如髓 染色，步骤同上。
1．4 检测方法：检测仪器为美国BD公司生产的
过氧化物酶(I玎【yeloperoxidase，MPO)、胞浆CD22(Cy-
高等优点对确定白血病细胞的系别起源具有重要
作用㈣。但也应注意到，用于检测胞浆内抗原的渗 析样本中异常细胞群体(白血病细胞)及成熟粒细胞
透剂及方法对结果会产生很大影响，选择不当会导 的MP0表达情况。用同型对照管做参照，设定MPO
致结果出现很大的偏差。本文就两种不同的渗透剂 的阳性界限。每个测定管收集10，000个细胞，其数
对MPo检测的影响做了配对比较分析。
l材料与方法 1．5统计学处理两样本含量相等，平均阳性率
1．1标本来源：20例骨髓标本采自我院住院患采用t检验。
儿，经形态学、免疫分型及细胞化学检查确诊为急 1．6过氧化物酶细胞化学染色采用魏希本
性淋巴细胞白血病(AL工0。(Wa8hbum)法p】。
1．2试剂来源：渗透剂％tonX一100原液、In- 2结果
2．1 用Triton
traP。erpTM渗透剂及单抗MsIgGl—FITC(同型对照)、
细胞及成熟粒细胞MPO阳性率见附表。
MPO—FITC(克隆号：CLB—MPO—1)和CD45一PC5均由
Couher公司提供。
1．3标本染色：将EDTA—Na2抗凝的骨髓液有核
细胞浓度调至2×107／ml，取50弘l先与5“CD45避
光反应15分钟，之后，用1％多聚甲醛固定15分，
离心弃上清，再加入O．1％Tritoll)(一100100山作用5
分钟，离心弃上清，加入50斗lPBS及20斗lMPO单
2．2 以上20例ALL标本中不成熟淋巴细胞的
抗避光反应30分，PBS清洗1次，最后加入l％多聚
过氧化物酶(POX)细胞化学染色结果皆为阴性，成熟
甲醛溶液混悬，上机检测。每次测定均设MsIgGl同
粒细胞全部为阳性。
型对照管平行操作；另取50斗l骨髓液用IntraP—
e川M试剂盒中专用的固定剂及渗透剂处理细胞并 3讨论
作者单位：100045北京，首都医科大学附属北京儿童医院血
液中心
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仪器在使用过程中需每半年校正一次，可极大 “jiaIlg Y蛐g：EvalIlation
ofl(odakDT一60．ILMoI娜曲一2000andBakerEncom‘
的节省定标试剂和调校时间。在检测过程中每单个
Measuri峙A1．戚neAIllina嘶lsferse(A工田
项目血清用量均为10弘l，特别适合于婴幼儿和老年
Creadnine(C彤汇)Calci砌(CA)Tot8l
人的检测要求。 删G)cli玛chem，1990≯6；1201．
通过以上试验表明，多层膜电极法测定血清钾 2李国军，沈文梅，张林峰．柯达DT瑚干化学分析仪的应用．分析仪
钠氯，线性良好，回收试验附合要求，测定结果的准 器，199
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