不同型别登革病毒融合外膜基因重组腺病毒的构建及表达.pdfVIP

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2015-09-29 发布于湖北
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不同型别登革病毒融合外膜基因重组腺病毒的构建及表达.pdf

中国人兽共患病学报 836 2008，24(9) ChineseJournalofZoonoses 文章编号：1002—2694(2008)09—0836—05 不同型别登革病毒融合外膜基因重组腺病毒的构建及表达* 张志珊1，严延生2，翁育伟2，何似2 摘要：目的模板，扩增包含CMV启动子一D1／D2EDⅢ一BGH 毒。迸一步感染BHK一21细胞，用间接免疫荧光法和Westernblot法检测重组蛋白在细胞中的表达情况。结果重组腺病毒蛋白。结论不同型别融合基因的重组腺病毒表达载体能有效地表达相应型别的日的蛋白。为进一步构建单一的四价重组腺病毒应用于登革疫苗研究奠定基础。关键词：登革病毒；外膜蛋白；DⅢ区；腺病毒载体中图分类号：R373．3文献标识码：A adenovirus Constructionand ofrecombinant ED]I[s expression encoding 1 2 fusionof virus and genedenguetype ZHANGZhi—shan，YAN Yu—we；，HEShi Yan—sheng，WENG Clinical First (Departmentof Laboratory，AfftliatedQuanzhouHospital Medical 362000，China) o{FujianUniversity，Quanzhou recombinantadenovirusEDIIISfusionof virus 1and2andtOinduce ABSTRACT：Toconstruct encoding genedenguetype its inBHK一21 domainms of iand2were PCRandclonedinto expression cells．envelope dengueserotypes amplifiedby pCD· NA3．1(+)tOrecombinant CMV generate plasmidpCDNA-D1／D2ED$．Afragmentencoding pA was from clonedintovector tO was amplifiedpCDNA-D1／D2ED$andpENTR4generateplasmid transfectedinto transferinto LRrecombinationreaction．TherecombinantadenoviruspAd—DI／D2EDlllwas pAd／PL-DESTby tO therecombinant i