多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究.pdfVIP

·136· 【实验研究】 多因素复合建立脾气虚证大鼠模型及以方测证研究* 宋红郑小伟王颖 浙江中医药大学 浙江杭州310053 摘要 目的：以大黄法、游泳力竭法、饥饿法多因素复合建立一种新的脾气虚证大鼠模型。方法：动物随 机分为对照组、模型组及中药组，以多因素复合法对模型组及中药组大鼠进行造模，2l天后处理部分大 鼠，检测指标。其余大鼠继续实验，以黄芪建中汤灌服中药组，生理盐水灌服对照组及模型组，21天后处 理大鼠，检914指标。结果：造模大鼠血清木糖浓度、血清肌酸磷酸激酶活性、血清胃泌素水平下降，胃窦G 细胞数减少，与对照组比较差异有统计学意义(P0．01)；经健脾中药复建后，中药组大鼠的脾气虚症 状、体征缓解，上述指标恢复，与模型组比较，差异有统计学意义(P0．01或P0．05)；与对照组比较， 差异无统计学意义(P0．05)。结论：多因素复合复制的脾气虚证大鼠模型稳定性良好，克服了单因素 造模持续时间短、自愈性强的缺点，经得起药物反证，是一种可行而稳定的脾气虚证造模方法。 关键词 多因素 脾气虚证 大鼠模型 以方测证 脾气虚证的造模方法虽多，但较多存在稳定性、重 重——于大鼠尾根部缠绕重量为该大鼠体重10％的保 复性差等不足。本实验尝试采用大黄法、游泳力竭法、 险丝，放人水深50cm、水温20℃的水槽中游泳，以力竭 饥饿法多因素复合的方法制作脾气虚证大鼠模型，并 为度——大鼠鼻尖没入水面10秒，日1次。③控制饮 以健脾中药反证，以期找寻一种稳定、可靠的脾气虚造 食，每日上午8：00给食，下午8：00撤食。共21天。 模方法。 实验至第22天，各组随机取出大鼠8只，处理作相关 1材料与方法 检测，其余大鼠继续实验。自实验第23天起，对照组 1．1 动物与分组：清洁级Wistar大鼠48只，由浙江中与模型组每日上午以3ml／只灌服生理盐水，日1次；中 药组每日上午以3ml／只灌服黄芪建中汤水煎剂，日1 医药大学实验动物中心提供，雌雄各半，体重180±209。 动物随机分为对照组、模型组、中药组，各组16只。 次。自由饮食，共21天。实验至第45天，处理大鼠， 1．2 药物与试剂：大黄制剂液：将生大黄饮片碎成粉， 作相关检测。 用蒸馏水浸泡，置于50℃水浴6h，去渣取汁。黄芪建1．5 症状、体征观察：实验全程观测动物的体重，食 量，粪便情况(腹泻、肛门污秽、拉尾排便)，毛色，嗜睡， 中汤(黄芪、桂枝、生姜各99，炙甘草69，白芍189，大枣 倦怠，乏力等情况。比较组问症状与体征的区别。 129，饴糖309)水煎剂：常规煎煮，浓缩为含生药6kg／ L。D一木糖试剂盒，南京建成生物工程研究所；胃泌素 1．6指标检测：全部大鼠眼球取血，分离血清，检测血 放免试剂盒，北京北方生物技术研究所；兔抗大鼠胃泌 清木糖浓度、血清肌酸磷酸激酶活性(CPK)、血清胃泌 素抗体，北京北方生物技术研究所；酶标记HRP二抗， 美国DAKO公司；二氨基联苯胺(DAB)，北京中山生二步法检测G细胞。G细胞计数：光镜高倍视野(× 物技术公司。 400)对每张切片取胃窦部5个视野，读G阳性细胞数， 1-3 并换算出每mm2面积内G细胞数。 主要仪器：SN-695型智能放免丫测量仪、Lx-20型 Beckman全自动生化分析仪、722型光栅分光光度计、石 值用均数土标准差(z±s)表示，采用方差分析。 蜡包埋机、Leitzl512型组织切片机、OLYMPUS双目显 微镜、I。EICADMLB偏光摄像显微镜。 2 结果 1．4 方法：对