柱前衍生化HPLC法测定发酵液中L瓜氨酸和L鸟氨酸含量.pdfVIP

第31卷第2期 南 京 工 业 大 学 学 报 (自然 科 学 版) Vo1．31No．2 2009年3月 JOURNALOFNANJINGUNIVERSITYOFTECHNOLOGY (NaturalScienceEdition) Mar．2009 柱前衍生化 HPLC法测定发酵液中 一瓜氨酸和 一 鸟氨酸含量 周 慧，郝 宁，严 明，许 琳 (南京工业大学制药与生命科学学院，材料化学工程国家重点实验室，江苏 南京 210009) 摘 要：建立一种应用异硫氰酸苯酯将 ，J一瓜氨酸和 一鸟氨酸柱前衍生后进行定量分析的高效液相 色谱法．实验 结果表明，瓜氨酸在0．2～2．0mg／mL范围内线性回归显著(R =0．9998)，平均回收率99．87％；鸟氨酸在0．2— 2．0mg／mL范围内线性回归显著 (R =0．9997)，平均回收率100．92％．应用该方法对发酵液中三一瓜氨酸和 一鸟氨 酸含量进行测定取得了满意的结果，能有效指导谷氨酸棒杆菌三一瓜氨酸的发酵生产． 关键词：高效液相色谱；柱前衍生；一瓜氨酸；L一鸟氨酸 中图分类号：0611．62 文献标志码：A 文章编号：1671—7627(2009)02—0077—04 DeterminationofL--citrullineandL--ornithinebyhigh performance liquidchromatographywithprecolumn derivation ZHOU Hui，HA0 Ning，YAN Ming，XU Lin (StateKeyLaboratoryofMaterials—OrientedChemicalEngineering，CollegeofLifeScienceand PharmaceuticalEngineering，NanjingUniversityofTechnology，Nanjing210009，China) Abstract：Amethodforreversed—phasehighperformanceliquidchromatography(HPLC)withphenyliso— thiocyanateprecolumnderivationwasdevelopedofrthedetemr inationofL．citrullineandL—ornithine．The calibrationcurvesofL—citrullineandL—ornithinewerelinearovertherangeof0．2～2．0mg／mL．andthe recoveyrateswere99．87％ and100．92％ (n=6)，respectively．Itcanbeusedasoneofthedirectand reliablemeansofrquantitativedeterminationofL—citrullineandL—ornithine．ThUS．itplaysaninstructive roleintheproductionofL—citrullinebycorynebacterium glutamicum． Keywords：HPLC；precolumnderivatization；L—citmlline；L-ornithine 一 鸟氨酸和 一瓜氨酸作为尿素循环的中问代 法 、纸层析法 J、酶法 和比色法 J．一瓜氨酸的分 谢产物，对氨态氮的排出以及解除氨中毒有重要的 析方法主要有酶法 、比色法 和薄层扫描法 。。．在 作用．随着研究的深入，一鸟氨酸已广泛应用于功 这些分析方法中，氨基酸分析仪法和酶法价格昂贵，纸 能型饮料及护肝抗癌药品等领域 ¨ J．一瓜氨酸能 层析法和薄层扫描法灵敏度都不高，比色法容易受到 通过调节体 内NO来参与一系列机体免疫反应提高