薄层色谱-光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量.pdfVIP

维普资讯 第4卷 第3期 中 国 食 品 学 报 Vo1．4 No．3 2004年 9月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology Sep．2004 薄层色谱一光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量 王江海 袁建平 徐世平 刘 昕 (中山大学国家教育部食品工程研究中心 广州 510275) 摘 要 灵芝三萜类化合物是灵芝孢子油中的主要功效成分 本文提 出了一种测定灵芝孢子油中总三萜含量 的可靠方法，即薄层色谱 (TLC)一光度法。该测定方法能；住确测定灵芝孢子油样品中的总三萜含量 ，且其准 确度明显高于直接光度法。实验结果显示，直接光度法的测定结果具有明显的正偏差。 关键词 灵芝孢子油 总三萜 薄层色谱一光度法 文章编号 1oo9—7848(2004)03-0076—04 灵芝孢子油是采用先进的超临界二氧化碳流 1 实验材料和方法 体萃取技术从破壁的灵芝孢子中萃取得到的油状 1．1 试剂和药品 脂质物。 目前在灵芝和灵芝孢子油 中已发现 120 熊果酸标准品由中国药品生物制品检定所提 多种灵芝三萜类化合物，因其化学结构的多样性 供；薄层层析板为天津市天河医疗仪器公司产 而具有广泛的药理活性 l【～ol。必威体育精装版的研究表明， 品；高氯酸 (分析纯)为天津市西青鑫源化工厂 灵芝孢子油中的脂质活性物质具有显著的抑制肿 产品；冰醋酸 (分析纯)、二氯 甲烷 (分析纯)、 瘤I11．12和抗艾滋病毒的活性 1【．。近年来 ，灵芝孢 甲醇 (分析纯)、三氯甲烷 (分析纯)和石油醚 子油产品已成为高档保健品中的珍品。 (分析纯)等为汕头西陇化工厂产品；乙酸乙酯 高效液相色谱法 (HPLC)和薄层色谱 (TLC)一 (分析纯)为中国医药上海化学试剂公司产品。 液相色谱 ／质谱 (LC／MS)法是测定灵芝孢子油 1．2 灵芝孢子油样品 中三萜类化合物和总三萜含量准确有效的分析方 lI2．1 灵芝孢子油产品 萌动激活纯灵芝孢子油 法 】。由于获得高纯度的灵芝孢子三萜类化合物 (I』INGZHIMASTER)由深圳学者生物有限公司 标准品的技术难度大，目前仅为极少数研究机构 提供 ；从国内和香港购得两个品牌的灵芝孢子油 所掌握。总三萜含量的常规测定方法是以熊果酸 产品；茶油为市售 ，作为分析对照品。 等三萜类化合物为对照品，用冰醋酸一香草醛和 1．2-2 灵芝孢子脂质提取物 称取由中山大学国 高氯酸为显色剂 ，用光度计直接测定总三萜的含 家教育部食品工程研究中心提供的破壁灵芝孢子 量 】。该方法已被用于不同灵芝中总三萜含量的 原料 l8．5543g，置 于 100mL 甲醇一二氯 甲烷 测定 。然而 ，当采用上述方法直接测定灵芝孢 (1：3)混合溶剂中，超声振荡 30min后进行过 子油中总三萜含量时，由于出现较强的干扰 ，其 滤 ，残渣再 以 100mL混合溶剂提取 ，并按此实 结果存在明显的正偏差。利用薄层色谱法或快速 验步骤重复提取4次。 柱层 析 (FCC)法对灵芝孢子油样 品进行预 分 超声振荡和提取4次后的残渣再用索氏抽提 离，可以基本排除其它组分对测定的干扰。为此 器抽提 ，并以三氯甲烷为溶剂抽提 72h。合并上 本文用薄层色谱一光度法测定灵芝孢子油中总三 述所有的提取液，在 50。C温度下减压旋转蒸馏 萜的含量。 以除去溶剂，得到浅金黄色油状的灵芝孢子脂质 提取物。