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中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2005, 25 ( 11) : 9 1～94 NA SBA ———一种新型禽流感病毒检测方法 1, 2 1, 2 1, 2 3 1, 2 刘乐庭 　刘 　爽 　封燕芸 　陈建国 　于常海 ( 1 北京大学神经科学研究所 　北京大学医学部神经生物学系 　教育部神经科学重点实验室 　北京 　100083) (2 香港基因晶片开发有限公司　香港 　3 北京大学生命科学院　北京 　10087 1) ( ) 摘要 　NA SBA nucleic acid sequence - ba sed amp lification 是一项持续等温的核酸扩增技术 ,特别 ( 适合于以 RNA 为模版的扩增 , 与其它常用禽流感病毒检测方法 病毒培养法 、免疫学方法和 ) PCR 相比,具有灵敏度高 、特异性强 、操作简便等特点 。就 NA SBA 的操作原理及其在禽流感病毒 检测中的成功应用进行综述 。NA SBA 不仅成为禽流感病毒检测的有力工具 ,而且对于其它恶性 传染病的监测 、检测同样具有重要价值和意义 。 关键词 　NA SBA 　禽流感 　检测方法 　　禽流感是一种从呼吸道疾病到严重性全身组织出 检测的结果仅仅说明被检测的禽类或动物曾经感染过 血性病变等多种症状的急性高度致死性传染病 , 其致 禽流感病毒 ,而不能准确反映当前是否感染或携带病 ( ) 病元凶禽流感病毒 A IV 属于 A 型流感病毒 ,是一种 毒 , 因此 ,在应用方面具有一定的局限性 。特别是 目前 负链 RNA 病毒 。根据其膜蛋白 HA 和 NA 的抗原性可 的家禽大多被注射疫苗免疫 , 则不能使用该方法进行 ( ) 将现有的 A IV 分为 15 种 HA 亚型 H 1～15 和 9 种 NA ( ) 筛查 。核酸检测方法 如 PCR 用于 A IV 的检测 ,灵敏 ( ) 亚型 N 1～9 。近来 , Fouch ier等在北欧又发现了一种 度高且快速 ,能够准确反映是否携带病毒 ,可结合其它 新的 A IV 病毒亚型 ,根据其基因序列和抗原性分析命 检测方法加以进一步判定 [ 5, 6 ] 。与常规 PCR 相比,荧光 名为 H 16 亚型禽流感病毒 [ 1 ] 。而在 16 种亚型中, H5 实时 PCR ( realtim e PCR )技术检测禽流感病毒 ,其灵敏 及 H7 被定为高致病性 [ 2 ] 。 度有很大提高 ,但是对于某些超低病毒载量的样品 ,仍 　　A IV 除感染禽类外 ,传播给人类的事件也屡有报 不能达到检测要求 [ 7～9 ] 。于是我们在此基础上开发了 道 。因此禽流感对社会经济和人类健康构成的严重威 一种增强型荧光实时 PCR ( ER TPCR ) 检测技术 , 灵敏