中药抗病毒性心肌炎的实验的研究现状.pdfVIP

第l一次全国中医心病学术年会(2008·长春)论文集 中药抗病毒性心肌炎的实验研究现状 罗钢张广文杨思进 (泸州医学院附属第二医院 四川泸州646000) 病毒性心肌炎(VMC)今年在国内外呈上升趋势，尤其在青少年中多发，可 发展为扩张型心肌病，严重危害人民身心健康。而柯萨奇B病毒(CVB)是导致病 毒性心肌炎的主要病原之一。随着分子生物学的快速发展，对本病的发病机制 研究有了很大突破，但治疗方面仍无大进展。国外主要着手于CVB3感染的疫苗 研制[1】，国内中医药在治疗方面有很明显的优势，效果较好，尤其是近几年由 于中药制备工艺的改进，许多中药提取物或中药有效成分抗CVB的研究逐渐增 多，研制出了一些效果很好的中成药复方制剂。现就中药抗病毒性心肌炎的实 验研究现状做一综述。 ldp药抗CVB3心肌炎的体外实验研究方法 近几年，随着细胞培养技术，尤其是原代乳鼠心肌、大鼠心肌细胞培养技 术的成熟，病毒性心肌炎的体外细胞模型得以建立，中药抗CVB3心肌炎体外实 验研究的内容得以深入，主要进行相关研究如下。 1．1在传代细胞上的抗CVB3和保护细胞作用的研究 传代细胞以其培养条件简单和技术难度小的优点，多年来被广泛应用于药 等，但目前多被采用的是Hela系。一般根据研究药物抗病毒不同环节分组(90直 接灭活组、药物吸附组和治疗组)进行研究，通过观察细胞病变方法和检测细胞 活性方法评价药物抗病毒和保护细胞作用。目前常用的检测细胞活性方法有 MTT法、3H．TdR掺入法等。陈美娟【2】等研究的中药复方制剂心安颗粒悬液体外 时，能阻止CVB3对Hela细胞的感染。张淑芹【3】等研究的蟾甘合剂体外对CⅦ3 病毒的抑制实验表明，蟾甘合剂能显著的抑制、延缓人羊膜细胞(FL)病变的出 现，阻止病毒的对人羊膜细胞(FL)细胞的吸附与穿入，对已进入细胞内的病毒， 蟾甘合剂能抑制病毒的生物合成及成熟释放，对病毒有灭活作用。刘晓雷等【4】 研究发现黄芪多糖：黄芪多糖在3 249 第十次伞国中医心病学术年会(2008·长春)论文集 量下，能抵抗CVB3对VERO细胞的杀伤作用，可有效抑制CVB3病毒引起的细胞 病变及病毒的繁殖。孙非【5】等的中药复方制剂体外抗CVB3研究表明：以高山 红景天和黄芪组成的复方制剂抑制细胞病变的半数有效浓度250mg／L，对病 毒增殖有明显抑制作用，并有量效依赖关系。 1．2在原代细胞上的抗CVB3和保护心肌细胞作用的研究 自1960年Harary首创用哺乳类动物大白鼠乳鼠的心脏进行心肌细胞单层培 养，并维持其白发节律性搏动40天以来，人们对心肌细胞培养技术不断改良。 目前心肌细胞培养已经成为一种十分成熟的实验技术。CVB3体外心肌炎模型主 要建立在乳鼠和成年鼠分离培养心肌细胞上，由于它们在体外维持正常心肌细 胞所具有的结构、功能及能量代谢等特点，因此将中药作用于体外病毒性心肌 炎模型将更有利于深入探讨药物作用环节和作用靶点。目前进行的相关研究包 括中药防治病毒性心肌炎研究，药物对CVB3感染后鼠心肌细胞搏动、细胞活性影 响，药物对心肌细胞释放酶的测定及药物对心肌细胞Ca：+内流的影响等。杨英 珍等【6】研究发现黄芪可减少CVB3引起大鼠心肌细胞cE+内流量，对细胞中病毒 RNA的复制具有抑制作用，可明显降低CⅦ3引起的LDH、AST释放，改善心肌 的搏动频率和形态。陈曙霞等【『7】研究表明：苦参能明显减低心肌细胞中病毒滴 度，减轻心肌细胞酶的释放，对感染病毒的心肌细胞具有保护作用。刘晓雷等【4】 研究发现黄芪多糖在新生乳鼠原代心肌细胞实验中可有效抑制CVB3病毒引起 的细胞病变及病毒的繁殖，对心肌细胞释放心肌酶也有一定的抑制作用． 2中药抗CVB3心肌炎体内动物实验研究方法 2．1动物模型的建立 目前，急性病毒性心肌炎的动物模型建立已经是一个较成熟的技术，CVB3 心肌病理变化，并应用CVB3．RNA克隆测序技术鉴定，以建立CVB3急性心肌炎 模型；陈曙霞等【9】观察腹腔注射8周龄Balb／c小鼠CVB3270天的心肌病理变化及 CVB3一RNA浓度，确立了慢性病毒性心肌炎动物模型。 2．2中药抗CVB3心肌炎药效作用研究方法 该研究的目的主要确定中药治疗CVB3,15,肌炎的作用和量