应用HPLC-DAD-ESI-MS2法指导破骨风中化学成分的快速分离鉴定.pdfVIP

中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集 讨论 香姜含有的香气有可能来源丁壬醛、葵醛两种成分，而芫荽也含有壬醛及葵醛成分。故香姜有芫 荽样香气至于香姜的挥发油性成分的分离、鉴定、要进一步深入研究具有一定意义。 孙佳明张辉奉 (长春中医药大学，中医药与生物工程研究开发中心，长春，130117)。 摘要s目的：建立破骨风中化学成分HPLC．DA弘ESl-MS2的分析方法，指导破骨风中化学成分的快速分离鉴定．方 法：利用RP．HPLC线性梯度洗脱筛选最佳测试条件，并应用I．cMS2技术指认图谱中的主要色谱峰，分析破骨风中 化学成分的种类、数量、结构和相对含量，选择感兴趣的化合物进行快速分离。结果：极大提高了破骨风中目标化 学成分的分离鉴定效率。结论：用文中的HPLC．DAD-ESI．MS2的分析方法可较伞面地反映破骨风中化学成分的种类、 数量、结构和相对含量，为破骨风化学成分的快速分离签定提供了有效的指导手段。 关键词：破骨风；化学成分；HPLC．DAD-ESI—MS2；快速分离鉴定 lanceolarium 破骨风(dasminum Roxb．)是术犀科素馨属植物清香藤的萃叶。产于我国湖北、江西、 浙江、福建、广东、广两、云南、贵州、四川等地。据中药人辞典记载破骨风有祛风除湿、活血止 痛功效。主治风湿腰腿骨节疼痛，跌打损伤，疮毒、痈疽llJ。至今报道的素馨属的化学成分有挥发 油、脂肪酸、环烯醚萜苷、黄酮类、生物碱类、苯丙素类、木脂素类，其中裂环环烯醚萜苷最多。 HPLC是目前分离复杂体系最为有效的分析1：具，由于其仪器自动化、普及化程度愈来愈高，已 成为中药分析最常用的仪器之一。采用现有的常规方法阐明植物药的活性成分，需对其进行大量的 提取分离，得到一定量的纯化合物(一般需5mg以上)，再进行NMR、MS等光谱测定，最终确定其 化学结构。整个过程需耗时数月乃至更长，不仅繁琐，而且目的性差，在确定其结构之前对目标化 合物的性质了解甚少，往往分离出来的成分并不是感兴趣的化合物。但是LC／MS分析则是将中药提 取物先经过HPLC分离，流份直接导入质谱仪进行分析，根据采集的质谱图(一级乃至多级)，可解 析流份的部分结构(如化合物类型、特征取代基等)。这样，仅需几十分钟的时间即可获得待测样品的 大量化学信息，包括化合物的可能结构(对于有些裂解规律明确的化合物，甚至可以确定其确切结构) 以及相对含量。而且有些微量或痕量成分在传统的分离过程中很可能被忽略，而MS具有高度的灵 敏性，可检测到Pg级物质，因此很容易发现新化合物的存型2|。 的提高了目标单体化合物的分离、鉴定效率。 1仪器与试药 1100series SL型多级离子阱质谱仪、低压四元 仪器：Agilent LC．MSD液质联用仪，包括：Agilent 型低温超速离心机；BP211D型十万分之一电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。 试剂：乙腈、甲醇、三氟乙酸为色谱纯(Fisher公司生产)；水为超纯水(Milli—Q)。 药材；采自江西省九江县，经江硝九江森林植物研究所谭策铭研究员鉴定为木犀科素馨属植物清香 lanceolariumRoxb．)的茎叶。 藤(dasminum 2实验方法 取续滤液作为供试品。 317 中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集 2．2色谱分析条件及方法 色谱柱：Kromasilram×4．6 C18(250 梯度洗脱：0～10min：(84：16)：10～30rain：(84：16)至(79：21)：30～50 min：(79：21)；50～ 90 min：(79：21)至(65：35)；90～100min：(65：35)rain。流速：0．3mL／min；检测波长：210nlil： min。 柱温：350C：供试品进样量：10$xl；检测：记录时间100 质谱条件：电离源：电喷雾离子源(ESI)：检测模式：正离子扫描：扫描范围：m／z50～1000；干 3结果与讨论 度最好，故选择了21