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第26卷增刊 分析测试学报 V01．26 FENXICESHI ofInstrumental 2007年9月 XUEBAO(Journal Analysis) Sep．2007 国际比对CCQM—P77a血清中氢化可的松测定 戴新华1，徐锐锋1，王卫华1，张春梅2 (1．中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所，北京100013；2．北京化工大学，北京100029) 近年来，临床检验的量值溯源问题日益受到国际上的广泛关注。欧洲议会和理事会于1998年lo 月签署的关于体外诊断器具的指令(Directive 键内容就是“校准物和(或)质控物的定值，必须通过现有的较高级别的参考测量程序和(或)参考物质 开展了大量国际问比对活动，目标是通过收集不同实验室不同分析系统的测定结果，构建国际比对数 据库，考察分析方法的可靠性，验证或确定标准物质的靶值，同时考核各国参与机构的分析检测能力。 血清肌酐(CCQM—K12、CCQM—K12．1)的国际比对。 氢化可的松是一种重要的肾上腺皮质激素，在体液循环中大部分与蛋白质键合。氢化可的松主要 参与碳水化合物代谢，同时具有阻碍周围组织中蛋白质合成和促进免抑制疫力的功能。氢化可的松是 一种非常重要的诊断标记物，可用于监控肾上腺皮质激素。因此，准确测定血清中氢化可的松的含量， 对于临床上正确诊断肾上腺功能非常重要。其测定的常规方法主要为各种免疫分析方法嵋。j，但由于 校准和方法特异性等原因，不同方法结果的变异往往比较大，而且一般出现正偏差，需要可靠的方法 Zealand)共6家单位参加。本文报道了我国参加此次国际比对的研究工作与结果。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 [9，1 l，12，12一D4]氢化可的松(标示同位素丰度98％，为CambridgeIsotope XDB—C18 液相色谱柱为Zorbax column(100×2．1mm；3．5 Eclipse 纯。 主要仪器为LTQLC／MS(Finnigan，美国)液相色谱质谱联用系统。Toledo L一200D(Max=200 10。g)天平(Mettler，德国)用于标准和内标溶液的配制，LIBOR g，d=0．05mg) 为Yamata(日本)产品。 性，每瓶约5mL，血清中氢化可的松浓度未知。参加比对的实验室各分发4瓶，根据CCQM的要求， 血清4瓶中的3瓶供正式测定，并报回测定结果，余下1瓶可用于预实验或结果的验证。我们实验室 于2006年7月收到比对血清样品，接收后立即于一80℃保存。 1．2标准溶液与内标溶液的配制 基金项目：国家科技基础条件平台专项(2004DEAl0160-3—5)；博士基金资助(TGQD05—02) 第26卷 分析测试学报 增刊 溶液，均用重量法配制。配制浓度均为2．0 mg／kg的氢化可的松标准溶液和内标溶液作为标准储备溶 液，于4℃下熔融密封保存。 1。3血清加标及工作标准溶液的制备 液，按下述分析方法经样品处理后测定标记氢化可的松和氢化可的松的丰度比，计算得到比对样品中 氢化可的松的大概含量。分析血清时，取1mL血清称重得到其精确质量，精密称取一定量的[9，11， 12，12一D4]氢化可的松内标溶液(约为100 txL)加入血清中，使样品中氢化可的松含量与内标的比例 近似为1：l。添加内标后轻轻振摇血清混匀，室温放置lh平衡。分析血清需同时制备1个工作标准溶 液，称取一定量的标准溶液和内标溶液，使标准中氢化可的松与内标量的比例接近1：1，标准溶液的 浓度尽量接近血清中氢化可的松的浓度。制备后轻轻振摇混匀，此工作标准溶液需要在每次测试时制 备。 1．4血清氢化可的松的提取与净化 于已加标的