登革热实验诊断技术进展.pdfVIP

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釜三星全里主壹圭鎏堑疸堂兰堡查堂查全垫 ·89· 登革热实验诊断技术进展 向浩综述,聂绍发审阅 华中科技大学同济医学院流行病与卫生统计学系,武汉430030 【关键词】登革热;实验室诊断 均不及蚊虫分离敏感。病毒分离是登革热的确诊依 据,是流行病学诊断最可靠的方法。但是,病毒血症 登革热是由登革病毒所致的一组虫媒性传染 存在的时间较短,通常与机体发热持续时间一致,大 病,传播媒介主要是埃及伊蚊。感染登革病毒后可 约2—7天l51,因此,只有对早期血液样本进行DV、 Fever 出现的临床症状较多,包括登革热(Dengue 分离才有较高的灵敏度,此外,该方法费时、繁琐,至 DF)、登革出血热(Dengue Fever Hemorrhagic少需要一周时间才能出结果,达不到早期、快速诊断 Shock Syndrome DI口)、登革出血综合征(Dengue 的目的,在临床上已经很少使用。目前国际上有用 DSS),现已发现4种血清型,分别为登革I、Ⅱ、Ⅲ、 分子生物学检测方法取代DV分离的趋势。 Ⅳ型。该病广泛流行于全球热带和亚热带地区,特 2常规血清学诊断 别是东南亚、西太平洋、中南美洲和非洲。该病发病 率和病死率均较高,是最为严重的一种虫媒病毒性 常规血清学诊断是比较经典的方法,也是病毒 疾病…1。据WHO提供的资料,全球有100多个国 实验室必备的方法,近几年也有很大的改进,尤其是 家有该病发生,每年有25亿人受该病威胁,5千万 出现了一些商品化的试剂盒或检测卡(如胶体金免 人感染病毒,50万人需人院治疗,病死率可高达 疫色谱法快速检查登革热IgM和IgG抗体的测试 5%[2|。 卡),对于实验设备要求不高,非常适合于基层实验 登革病毒感染的实验室诊断,可供选用的方法 室使用。在病毒的鉴定中也必不可少。常用的方法 主要有病毒分离、血清学检测(抗体和抗原检测)、 PCR等方法。WHO曾经把血凝抑制试验(HI)作为(CF)和中和试验(NT)L6J。 登革热的标准诊断方法。然而,病毒分离所需时间 较长,达不到快速诊断的目的,而常规的血清学诊断 凝活性,在适宜的pH条件下可凝集红血球,而此凝 又因存在广泛的交叉反应而受到干扰。近年来,随 集能被相应的抗血清抑制。利用这一反应,可对抗 着登革病毒基因组序列分析成功及核酸杂交和聚合 原抗体进行鉴定[7|。血凝抑制抗体测定分原发抗 酶链反应(PCR)技术的建立,对登革病毒感染的诊体反应和继发抗体反应两种。原发抗体反应是第4 断,从传统的病毒分离、血清学检查,进入到对病毒 日以前的血清登革抗体一般低于1:20,恢复期(发 RNA进行分子生物学检测的新阶段。 病后1~4周)血清抗体滴度增长4倍以上,但不超 登革热病毒感染机体后可呈现两种不同的状 过1:1280。继发抗体反应是第5日前血清抗体滴 560以上【5J5。 态,即原发感染和继发感染。在第二次感染异型 度低于1:20,而恢复期抗体滴度达1:2 DV的患者中容易发生Ⅸ伍和DSS,且病死率较血抑抗体反应作为诊断用的困难之处在于与其它虫 高,目前在发病机制研究中比较

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