耐酸酵母处理衣康酸母液的初步的研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 耐酸酵母处理衣康酸母液的初步研究 李丕武1，赵祥颖1，王美荣2，刘建军1 (1．山东省食品发酵工程研究重点实验室。济南250013j2．山东轻工业学院食品科学系，济南250010) 摘 要：本研究从衣康酸发酵工厂分离到一株耐酸酵母。经过分纯及驯化后进一步筛选，得到 一株能在衣康酸母液中生长较好的菌种N44，耗糖事达到17．2％．以该菌种为出发菌株，初步 考察了接种t、母液浓度对N44在农康酸母液生长和耗糖情况，并研究了其摇瓶发酵的进程． 前 言 衣康酸是一种新型的生物化工产品，它是以淀粉为原料，土曲霉为生产菌种，采用深层 发酵的方式生产的[u。衣康酸是一种重要的化工中间体，广泛应用于橡胶、丁苯胶乳、腈纶、 除草剂等领域[2]。当前通用的衣康酸提取方式为重结晶法，经过两次结晶，得到精制衣康酸 产品，结晶形成的母液再进行脱色浓缩，继续结晶提取其中的衣康酸[3]。由于发酵液中除了 含有衣康酸外，还有许多其它杂质，如：元机离子、胶质、蛋白、残还原糖等[．]，虽然经过脱色、 离交等工序去除了其中的大部分，但仍有一小部分留在酸液中，经过多次浓缩，这些杂质的 浓度在母液中可以增加几十倍，尤其是残糖的浓度可达到10一20％，直接导致这部分母液 中的衣康酸无法回收，只好排放掉，既造成了浪费又极大地加重了污水处理的负荷，因此如 何改善母液质量，提高衣康酸提取收率、降低COD排放是衣康酸生产企业需要解决的一个 重要课题。本研究拟采用生物的方法，从衣康酸生产车间筛选耐酸酵母，利用酵母在母液中 生长来进一步消耗母液中的各种有机和无机杂质，改善母液质量。 1 材料与方法 1．1菌种 ， 从衣康酸母液贮罐筛选出酵母菌株：SFAY一1，sFAY一2。 1．2培养基 1．2．1斜面培养基： 5％麦芽汁添加1％衣康酸母液，琼脂2．5％ 1．2．2液体种子培养基(g／L)： 12 9 1．5 NH．CI NH‘N03 MgS04·7H20 1．5 0．015ZnSO‘0．15 KH2P04FeSO‘·7H20 葡萄糖20 4．0 pH 1．2．3菌种驯化培养基 5％麦芽汁分别添加加5％、8％、10％的衣康酸母液。 724 第四次全国发酵工程学术讨论会 1．2．4摇瓶培养基： 衣康酸母液稀释液 1．3实验方法 1．3．1菌种驯化 将实验室保存的从衣康酸母液中分离得到的的两株酵母菌，按从低到高的顺序依次 传接到添加不同浓度母液的驯化培养基中，30℃进行驯化培养，然后从高浓度母液分离 生长旺盛的酵母菌株，进行摇瓶筛选。 1．3．2摇瓶初筛 温培养箱中培养5天，测定发酵液的还原糖及茵体含量。比较发酵前后还原糖的量，选 出耗糖较高的菌株。 1．3．3摇瓶复筛 将初筛得到的较好菌株传代后，每支接三个摇瓶，同上进行摇瓶发酵，进一步挑选性 能稳定的较优菌株。 1．3．4农康酸含量的测定嘲 1)酸碱滴定法；2)溴法 1．3．5还原糖的测定 斐林试剂法 1．3．6耗糖率的计算： RsH：—Rsl瓦--一Rh×100％ “sl R。。——耗糖率 Rs-——摇瓶发酵初糖． Rs-——发酵初糖 1．3．7菌体量的测定 用滤纸过滤发酵液，并用蒸馏水冲洗干净滤出菌体，50℃烘干至恒重，称菌体干重。 2结果与讨论 2．1菌种的筛选 2．1．1菌种初筛 从浓度较高的衣康酸母液驯化液中分离耐受母液酵母菌株，共挑取51株单菌落进 行摇瓶初筛，母液浓度稀释4倍，计算发酵液的菌体重量和耗糖率，结果见图1—1。 体量最大的是N12为0