一种新的荧光素类荧光探针的设计合成及其对血清中的组氨酸的选择性标记研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年10月 JOURNAl，OFGUANGXINORMALUNIVERSITY 一种新的荧光素类荧光探针的设计合成及其对血清 中的组氨酸的选择性标记研究 李晓花，董素英，段学军，马会民+ 中国科学院化学研究所分子科学中心，北京100080) 组氨酸是人类必需的一种氨基酸．它含有高反应活性的咪唑环，并在生物体系中金属离子的传输、神 经递质的传送等方面起着重要的作用“。1．所以，生物体液中组氨酸的选择性测定对其生物功能的研究具 有重要意义．然而，由于各种氨基酸在结构及性质上的相似性，选择性测定单一种的氨基酸常常需要借助 较复杂的分离技术(如高效液相色谱，毛细管电泳等)才能完成． 各种化合物的官能团反应可为一些高选择性的光学标记提供基础”。．环氧氯丙烷作为合成中问体，在 许多方面尤其在高分子领域得到了广泛的应用，然而其活性环氧环却很少被用作光学探针的标记基团而 原子易发生加成反应的特性“一，使其与探针EPANS上的活性环氧环发生加成作用，实现了对组氨酸的选 溶液和乙醇，并且具有长的分析波长、高的荧光量子产率等特点，适合对微量组氨酸的标记分析． 1试验部分 该试剂可由环氧氯丙烷与荧光素在碳酸钠的乙醇溶液中于55℃反应6h而得．用柱色谱(淋洗液为 MHz， CH3CH2()D)，a，ppm：2．8～3．0(m，epoxyCHCH2，3H)，4．1～4．4(s，CH2 ics，10H)．nFAB 23Hl。06]_ 387．0872120，found387．0874022． 2结果与讨论 nm／513 ℃左右反应2h．标记反应导致EPF的荧光强度(九x。=485 基金项目：国家自然科学基金资助项目 作者简介：李晓花n976一)，女，博士研究生；马会民(1961)．男，博士．研究员 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 H2N CH—cIOH 3心s 陟。岬 EPF j试c0芒一8cou∞卷]正 舌_一F忒火 ^／nnl 3一(2-hydroxy一3一【4一(2·amino-2一carboxyethyl)imidazol—I—y1]propoxy}fluorescein 图1组氨酸．EPF以及标记产物的结构 图2 EPF及其与组氨酸反应溶液的荧光光谱 h，EPFt891 反应条件：80。C，pill2o的NaOH溶液中加热2 Ftmo／／ L)在有‘a)0．(b)2．23．(c)446和(d)891tLmol／L的组氨酸存在时 的荧光激发和发射光谱(bm，一485rim／513rim) 氨酸的浓度在00079 的无机离子以及l 记测定，得到的浓度为(105．3±2．o)pmol／I，(”一5)，且与吸附伏安法测定的结果吻合． 参考文献 TE