液-质联用研究槐定碱、槐果碱和苦参碱在兔体内的药代动力学.pdfVIP

第33 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第11 期 2005 年11 月 Chinese JOurnal Of Analytical Chemistry 1627 ~ 1630 液-质联用研究槐定碱、槐果碱和苦参碱在兔体内的药代动力学 吴永江 陈建军 程翼宇＊ （浙江大学药学院中药科学与工程学系，杭州310028 ） 摘 要 建立了一种液-质联用测定家兔血浆中槐定碱、槐果碱和苦参碱浓度的方法，并用于生物碱的药代动 力学研究。分析方法的线性范围为槐定碱 13. 2 ~ 995. 0 !g/ L ，槐果碱7 . 0 ~ 530 . 0 !g/ L 和苦参碱8. 8 ~ 655. 0 !g/ L ，回收率为90 . 2% ~ 99 . 8% 。药代动力学参数计算结果表明，槐定碱和槐果碱符合二室模型，而苦 参碱则符合三室模型。比较苦黄注射液和混合标准品注射后的药代动力学参数，表明苦黄注射液中的其他成 分对槐果碱有促进其消除的作用，对槐定碱的消除可能有促进作用，而对苦参碱则没有影响。 关键词 槐定碱，槐果碱，苦参碱，苦黄注射液，液-质联用，药代动力学 ! 引 言 苦参为常用中药，其主要成分为生物碱类物质，具有很强的生理活性。苦参生物碱主要有氧化苦参 碱（OMT ）、苦参碱（MT ）、槐果碱（SC ）和槐定碱（SRI ）等。这些物质具有很强的抗心率失常、抗病毒和抗 ［1 ~ 3 ］ 肿瘤等作用 。苦黄注射液为中药复方静脉注射液，由苦参、大黄、茵陈、柴胡和大青叶组成，具有清热 利湿、疏肝退黄的功能。苦参为方中主药，苦参碱和槐果碱的含量很高，槐定碱较高，不含氧化苦参碱。 目前分析苦参生物碱类物质药代动力学的方法有HPLC 、CE 和GC 等［4 ~ 6 ］，HPLC 和CE 所用的检 测器多为UV 检测器，GC 中常用FID 。由于这些生物碱的紫外吸收很弱，所以UV 检测的灵敏度较低， 对血浆中低浓度生物碱无法进行准确定量。而MS 检测器选择性好、灵敏度高，由此本研究建立了一种 快速测定兔血浆中槐定碱、槐果碱和苦参碱的液相色谱-质谱联用方法，并将该方法用于3 种生物碱的 药代动力学研究，得到了满意的结果。 # 实验部分 # . ! 仪器与试剂 1100 液-质联用仪（美国Agilent 公司），液相色谱配有真空脱气机、四元梯度泵、自动进样器、柱温 箱和二极管阵列检测器；四极杆质谱仪配电喷雾离子源（ESI ）。苦黄注射液由常熟雷允上制药有限公 司提供；槐定碱、槐果碱和苦参碱对照品（98. 0% 以上）购于宁夏华丰生物制品厂；实验用家兔由浙江大 学动物中心提供。甲醇为色谱纯（德国Merck 公司），二乙胺购于杭州化学试剂厂，水由Milli-O 纯水系 统制得。 # . # 实验方法 # . # . ! 样品采集与处理 将含SRI（0 . 228 g/ L ）、SC（0 . 184 g/ L ）和MT（0 . 318 g/ L ）的混合对照品溶液 和苦黄注射液（SRI 、SC 和MT 的浓度分别为0 . 081、0 . 147 和0 . 369 g/ L ）按1. 5 mL/ kg 的剂量经兔子耳 缘静脉注射后，分别在1、5 、10 、15 、20 、30 、40 、60 、90 、120 、180 、240 和300 min 时间点采样。血样置于 1. 5 mL 肝素管内，3000 r/ min 离心10 min ，得血浆。取0 . 2 mL 血浆，加入甲醇0 . 3 mL ，用涡旋混合器混 合3 min 去除蛋白，然后12000 r/ min 离心10 min ，取上清液50 !L 进样分析。 # . # . # 色谱-质谱分析条件和数据处理 色谱柱为ZORBAX Extend-C 18柱（5 !m ，4 . 6 mm 250 mm ）， 流动相为甲醇= 水= 二乙胺（50 =50 =0 . 07 ），流速0 . 8 mL/ m