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第38卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第9期 Chinese of 1305～1310 2010年9月 Journal Chemistry Analytical DOI：10．3724／SP．J．1096．2010．01305 毛细管电泳柱端电化学发光法分离测定 药物和尿液中的盐酸维拉帕米 梁汝萍1 朱晓艳1 陶移文2 汪敬武“ 1(南昌大学化学系，南昌330031)2(广州医学院药学系，广州510182) 摘要采用带有柱端电化学发光(ECL)检测池的毛细管电泳(CE)法分离并测定盐酸维拉帕米(Verapamil， VRPM)。盐酸VRPM作为共反应剂，增强了吡啶钉的电化学发光强度。在优化的条件下，ECL强度与VRPM 成功用于药物和人体尿样中盐酸VRPM含量的测定。研究了VRPM与牛血红蛋白(BHb)的相互作用，计算 其结合常数为3．72×103 L／tool，最大结合量为1．375×10一mol。 关键词毛细管电泳；柱端电化学发光；盐酸维拉帕米；吡啶钉；药物分析 1 引 言 示。VRPM是第一代钙通道阻滞剂。临床上VRPM广泛用于心律失常、心绞痛及高血压的治疗¨J。对 于阵发性、室上性心动过速疗效显著，还可用于心房颤动、心房扑动、房性早搏等症状。目前，分析盐酸 VRPM的常用方法有高效液相色谱法口】、反相高效液相色谱法”1和液相色谱．质谱法H1等。但这些方法 存在耗时长，运行成本高，预处理繁琐，测定线性范 CH，ok、州 车H，，=』ocH， 围窄等缺点。 由于盐酸VRPM分子结构中含有叔胺基，它很 eH，CH， 有可能作为共反应剂，增强三联吡啶钉(T而s(2，2’‘ 图1盐酸维拉帕米的化学结构式 bip州dyl)-ruthenium(D)，Ru(bpy)；+)的电化学发光强 Struct呲of Fig．1 Vempamilhydrochlofide(VRPM) 度怕J。基于该体系的Ru(bpy)；+发光效率高、水溶 液稳定等优点，是可优良的ECL试剂而被广泛应用MJ。是继高效液相色谱法之后，分析仪器的重大突 破。其突出的优点是高分辨率和样品用量少。因此，本研究提出采用CE柱端电化学发光(CE．ECL)检 测法分离并测定盐酸VRPM。近年来，CE—ECL已广泛应用于药物【7，8J、生命物质旧J引的分离和测定。盐 酸VRPM与其它药物一样，在人体内与蛋白质的结合作用，会影响药物在人体内的分布和排泄率。药 物在人体内未结合的浓度影响药物在人体内的分布及其作用。因此，本研究对盐酸VRPM与蛋白质的 相互作用进行了探讨，测定了结合常数和最大的结合量。本方法具有快速、灵敏、简便等特点。结果准 确可靠，可用于药物、临床样品中盐酸VRPM的分析测试及质量控制，并为药理研究奠定了基础。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 cm MPI—B型多参数化学分析测试系统(西安瑞迈分析仪器有限责任公司)；未涂层石英毛细管(37 i．d．，360 ×25斗m Ixmo．d．，河北永年光导纤维厂)；酸度计(上海大中分析仪器厂)。 吡啶钌纯品(Tris(2，2-bipyridyl)ruthenium(1I)chlorideChemical公司)；VR— hexahydrate，美国Aldrich PM标准品(中国药品生物制品检定所)；盐酸VRPM片剂(江苏方强制药厂(糖衣片)、广东华南药业集团 (薄膜片))；VRPM