琼花叶表皮特征与叶绿体发育超微结构观察.pdfVIP

第 31卷 第 6期 电 子 显 微 学 报 Vo1．31．No．6 2012年 12月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2012—12 文章编号：1000—6281(2012)06-0534—05 琼花叶表皮特征与叶绿体发育超微结构观察 金 飚 ，张 敏 ，高克利 (扬州大学园艺与植物保护学院 内蒙古工业催化重点实验室，江苏 扬州225009) 摘 要：利用扫描 电镜和透射 电镜观察了琼花叶片表皮形态和叶绿体发育结构特征。结果显示：(1)叶上表皮毛 分布稀疏，多为单毛和分枝少的复毛，下表皮分布较密，多为星状复毛，在叶脉表面及周围分布最为密集。(2)叶芽 细胞 中有较多前质体发育成叶绿体 ，叶绿体通过 出芽和分裂实现增殖。成熟叶片叶绿体形态以球形为主，近细胞 膜分布，老叶片叶绿体基粒片层结构稍模糊，但叶绿体形态和分布变化不大。对叶片表皮毛作为植物分类学依据 以及琼花 叶绿体的发育过程进行 了讨论 。 关键词：琼花；表皮毛；叶绿体发育；叶片发育 中图分类号：Q949．781．3；Q336 文献标识码 ：A 琼花 (Viburnummacrocephalum f．keteleeri)，荚 min，100％丙酮加无水硫酸钠 2次，各 10min，丙酮 莲属 (Viburnum)半常绿灌木 ，为观赏价值很高 的园 与乙酸异戊酯2：1、1：1、1：2混合液脱水处理 ，各 10 林树种 。荚蓬属原属于忍冬科 (Caprifoliaceae) ， min，纯乙酸异戊酯一次30min。在 IB一3离子溅射 然而近年来根据分子系统学证据将其划入五福花科 仪上喷金 20min后 ，将样 品置于 PhilipsXL一30型 (Adoxaceae) 。荚莲属超过 150多个种，并分布在 环境扫描 电镜下扫描拍照 。 世界各地 ；大多为灌木，单叶，但叶的形态种间变化 1．2．2 透射电镜观察法 较大 。叶的形态特征通常是环境适应的结果 ，尤 取 3种不 同发育阶段 固定的叶片 (0．5mm ×2 其叶的附属物如叶表皮毛形态等，与环境 因子密切 mm)，经0．1mol／L磷酸缓冲液 (pH=7．2)冲洗 3 相关 ，也常被用来作为植物分类 的依据。叶绿体是 次 ，每次20min。在 0．1mol／L磷酸缓冲液配制 的 叶片进行光合作用的场所，其结构与植物生理功能 1％锇酸中，4℃下固定8h，用蒸馏水冲洗 3次 ，每次 密切相关 。目前有关荚莲属植物叶片表皮特征与叶 20min。乙醇浓度梯 度 30％、50％、70％、80％、 绿体发育报道很少 ，本研究通过对琼花叶表皮毛的 90％、100％3次逐级脱水 ，每级 20min。环氧丙烷 微形态特征与不同发育时期叶片中叶绿体形态和分 置换 2次 ，再用环氧丙烷与包埋剂 1：1浸透 12h， 布的观察 ，探讨表皮毛在分类上的应用以及 叶绿体 100％包埋剂浸透 24h后，用 Epon812环氧树脂包 发育进程 ，为荚莲属植物提供形态学参考。 埋 ，用 LKB．V超薄切片机切片，醋酸铀染色 30rain 和柠檬酸铅染色 15min后 ，透射 电镜 (JEOLJEM一 1 材料与方法 1230)下观察并拍照 。 1．1 材料 2 结果与分析 采集琼花尚未展叶的叶芽、已发育成熟的叶片、 脱落前 的老 叶 (前一年宿存枝条上 的叶片)，用 2．1 琼花叶表皮形态特征 2．5％戊二醛溶液 固定 ，4℃冰箱保存待用 。