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江西农业大学学报 20 11，33 (4 ):0812 － 0816 http :/ / xuebao． jxau． edu． cn
Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E － mail :ndxb7775@ sina． com
长喙田菁SrPCS1 的原核表达
及多抗血清的制备
， ，
李安明 邓青云 李德华
( ， 432000)
孝感学院 生命科学技术学院 湖北 孝感
: pGEX － 4T － 1 ， PCR、 (Sesbania rostrata)
摘要 以原核表达载体 为基础 通过 酶切与连接构建了含长喙田菁 植物
螯合肽合成酶SrPCS1 cDNA 开放阅读框序列的 GST － SrPCS1 原核表达载体pAM34 ，并将其转化表达菌株
BL21 (DE3)，28 ℃ ， 0 ． 1 mmol / L IPTG ， Western blotting ， SDS
在 用 诱导融合蛋白的表达 通过 鉴定融合蛋白 将
－ PAGE ， Western 。
分离得到的融合蛋白质免疫新西兰白兔 通过 点杂交对免疫血清的效价进行检测 研究结果
表明: GST － SrPCS1 ， 1∶ 2 000 ，
通过大肠杆菌表达出 融合蛋白 免疫血清的效价为 制备的血清有较高的活性与特
异性。
: ; ; ;
关键词 植物螯肽合成酶 原核表达 融合蛋白 抗血清
中图分类号:Q943． 2 文献标志码:A 文章编号:1000 － 2286 (2011)04 － 0812 － 05
Prokaryotic Expression of the Recombinant SrPCS1 and
Preparation of Polyclonal Anti-serum Against SrPCS1
LI An-ming ，DENG Qing-yun ，LI De-hua
(School of Life Sciences and Biotechnology ，XiaoGan University ，Xiaogan 432000 ，China)
Abstract :The prokaryotic expressing vector pAM34 containing Sesbania rostrata phytochelatin synthase1
open reading frame was constructed on the base of pGEX － 4T － 1 and transferred into E． coli BL21 (DE3)，
then the fused protein GST － SrPCS1 was induced by 0 ． 1 mmol / L at 28 ℃ ，identified by western blotting and
the rabbit was immunized with the purified protein． The results suggested that the fusio
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