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解旋酶 RECQ5β的DNA 解旋及退火过程动力学研究         摘 要 RecQ 家族的解旋酶被称为基因组的守护者。他们在基因组的重组，修复的 过程中发生作用，维持基因组的完整性和稳定性。基因组的不稳定是许多疾病 发生的重要条件。而随着研究的推进，人们发现在人体中 RecQ 家族解旋酶的 缺失或者变异会导致一些肿瘤易患型综合症。为了更好的了解和阐明肿瘤产生 的原因，人们对RecQ 家族解旋酶的研究也日益深入。 RecQ 家族解旋酶是组成解旋酶超家族 SF2 的成员之一。在研究RecQ 家族 的解旋酶过程中发现，他们不仅具有解旋酶的活性，有些还具有促进DNA 退火 的活性或是核酸外切酶的活性。这些解旋酶所具有的生化活性应该是与其生物 学功能相对应的。我们研究的目标蛋白是人类 RecQ 家族的成员 RECQ5 解旋酶。 RECQ5 解旋酶具有解旋和退火的双重活性。其解旋和退火的动力学机理现在都 还不清楚。结合快速停流和荧光滴定设备，利用荧光共振能量转移的方法，我 们系统的研究了 RECQ5 的结合，解旋以及退火的动力学过程。首先，对 RECQ5 的解旋特性有了初步的了解。其次，我们还进行了 ATP 水解循环中 RECQ5 解 旋酶与 DNA 的结合和解离动力学的研究，使我们对 RECQ5 与 DNA 的作用过 程有了清楚的了解。并通过对退火动力学实验数据的分析，我们提出了 RECQ5 促进单链 DNA 退火形成双链过程的动力学模型。 关键词：RECQ5β、快速停流、荧光共振能量转移、解旋活性、退火 I    解旋酶 RECQ5β的DNA 解旋及退火过程动力学研究       Kinetic Studies on the Mechanism of RECQ5β-catalyzed DNA Unwinding and Annealing Abstract The members of RecQ helicase family are known as the guardian of genome. They play essential roles in the process of recombination and repair for maintaining the genomic stability and integrity. The genomic instability leads to tumor or some other diseases. With getting more detailed information through research, we related some tumor-prone syndromes with the deletion or mutation of RecQ family helicases. In order to clarity the mechanism of tumorigenesis, diagnosis and treatment, we pay more attention to RecQ helicase family and promote extensive research. RecQ family helicases belong to superfamily-II of helicase. On the study of RecQ family helicases, it is found that the helicases catalyze the unwinding of duplex DNA as well as p