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本科毕业论文(设计)手册 (届) 题 目: 新型去除血清白蛋白方法的研究 学 院: 专 业: 学 号: 姓 名: 指导老师: 职称: 目 录 中文摘要 5 英文摘要 6 引言 7 1. 血液蛋白质组学的概述 7 2. 8 2.1 材料 8 2.1.1 标本 8 2.1.2 试剂 8 2.1.3 主要仪器 8 2.1.4 实验所需液体配置 9 2.1.5 样品去脂 9 2.2 血清中白蛋白的去除 9 2.2.1 柠檬酸沉淀法 9 不同有机溶剂实验 9 不同浓度的柠檬酸实验 9 不同物种适用性实验 9 2.2.2 改良的TCA/丙酮沉淀法 10 2.2.3 DAC沉淀法 10 3. 结果及讨论 10 3.1 优化血浆白蛋白的沉淀条件 10 3.2 与其他不同的方法的比较 13 3.3 不同物种之间的使适用性 14 4. 结论 14 5. 展望 15 参考文献 致谢 17 新型去除血清白蛋白方法的研究 摘要:对血清蛋白质的分析是一种寻找疾病生物标记及药物发现的重要方法之一。每升血液中血清蛋白浓缩物只有皮克到克含量,这样微少的含量对深入蛋白质分析之一种阻碍。因此,除去高含量蛋白质比如白蛋白有利于更容易检测和鉴别低含量蛋白质。本论文旨在评估在二维双向电泳之前以柠檬酸-乙醇处理血清是否高效去除白蛋白从而能更好的检测出低含量蛋白浓缩物。首先实验中用该方法去除白蛋白。结果显示能够有效以及迅速的去除白蛋白而且更环保更加简单。 关键词:白蛋白;双向凝胶电泳;血清蛋白质组;柠檬酸沉淀 A new precipitation method to remove albumin from serum Abstract: The proteomic analysis of serum has been a major approach to determining biomarkers for early diseases and drug discorevy. The protein concentration of serum ranges from picograms to grams per liter, making it difficult to achieve in-depth proteomic analysis. So removal of highly abundant proteins, such as serum albumin, is required for facilitating detection and identification of low-abundant proteins. The aim of the present study was to evaluate whether treatment of serum with citric acid-ethnol method before two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) analysis removed serum albumin to allow the visualization of low abundant proteins. Here we first use this method to remove serum albumin. The results indicate that this method achieved good albumin removal and is a rapid, economical, and a simple easy Method. Keywords: Albumin; Two-dimensional gel electrophoresis; Serum proteome; Citric acid precipitation 引言 蛋白质组学研究已经成为当今生命科学的热点之一蛋白质作为生命活动的主要承担者在机体生理功能中发挥着重要作用一直以来也是研究的重点蛋白质组学是在特定细胞或组织水平上对蛋白质的表达进行研究运用这项技术可以在正常与病理情况下检测蛋白的差异表达应用蛋白质组学在临床研究方面可以研究特定蛋白与疾病的关系从而找到疾病标记蛋白,为临床提供新的诊断依据。血液中的蛋白质是持续变化机体很多病理变化都能在血液蛋白中得到相应的体现,而且血浆易于获取因此在蛋白质组学研究方面将会有很大的应用。 双向电泳[1]是蛋白质组学研究的核心技
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