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第2节微生物的培养技术及应用

第1课时微生物的基本培养技术

[学习目标]1.概述培养基的成分和配制方法。2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。3.概述微生物纯培养的基本操作要求。

一、培养基的配制

1．培养基的概念：人们按照微生物对________________的不同需求，配制出供其_______的营养基质——培养基，用以培养、________、鉴定、________微生物或积累其代谢物。

2．培养基的种类

培养基种类

划分标准

培养基特点

作用

_______培养基

加凝固剂，如_______

微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种

半固体培养基

容器放倒不致流出，剧烈震动则破散

观察微生物的运动、分类鉴定

_______培养基

不加凝固剂

常用于工业生产

特别提醒固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。

3．培养基的营养构成

(1)主要营养物质：水、________(提供碳元素的物质)、________(提供氮元素的物质)和无机盐。

(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成

组分

含量

提供的主要营养

牛肉膏

5g

__________________________等

蛋白胨

10g

____________等

NaCl

5g

无机盐

H2O

定容至1000mL

水

(3)培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加________；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至_______；在培养细菌时，一般需要将培养基调至__________；在培养厌氧微生物时，需要提供______的条件。

特别提醒培养基的配制原则：目的要明确；营养要协调；pH要适宜。

判断正误

(1)牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质()

(2)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源()

(3)培养不同微生物的培养基成分完全一样()

任务一：概述培养基的种类和营养构成

1．结合提供的资料和教材中的“1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析并回答下列问题：

资料一配制培养酵母菌的培养基：称取去皮的马铃薯200g，切成小块，加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20g琼脂，用蒸馏水定容至1000mL。

资料二100g马铃薯中含有80g水、2g蛋白质、16g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。

(1)按物理性质划分上述两种培养微生物的培养基的种类。

(2)分析上述两种培养微生物的培养基的营养构成。

(3)为什么培养基需要氮源？

2．如表是某微生物培养基的成分，请分析该培养基可用来培养哪种微生物？若除去①，此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗？

编号

①

②

③

④

⑤

成分

(NH4)2SO4

KH2PO4

FeSO4

CaCl2

H2O

含量

0.4g

4.0g

0.5g

0.5g

100mL

3．培养微生物时，培养基中是否必须有碳源和氮源？

几种微生物的营养和能量来源

微生物

碳源

氮源

能源

蓝细菌

CO2

NHeq\o\al(＋,4)、NOeq\o\al(－,3)等

光能

硝化细菌

CO2

NH3

NH3的氧化

根瘤菌

糖类等有机物

N2

有机物

大肠杆菌

糖类、蛋白质等有机物

蛋白质等

有机物

1．关于微生物的营养，下列说法正确的是()

A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源

B．凡是碳源都能提供能量

C．除水以外的无机物仅提供无机盐

D．无机氮源也可能提供能量

2．(2023·江苏宿迁高二期中)下列有关微生物培养基种类及配制原则的叙述，正确的是()

A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及特殊的营养物质

B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产

C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、O2、渗透压等的影响

D．淀粉可作为所有微生物的碳源

二、无菌技术

获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术主要包括消毒和灭菌。

1．消毒

(1)概念：指使用较为________的物理、化学或__________等方法杀死物体表面或内部________微生物。

(2)适用对象：操作的__________、操作者的________和手等。

(3)常用方法：__________消毒、__________消毒等。

2．灭菌

(1)概念：指使用________的理化方法杀死物体内外________的微生物，包括________和孢子。

(2)适用对象：用于微生物培养的器皿、________用具和________等。

(3)常用方法：________灭菌、干热灭菌