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第62页,共89页,星期日,2025年,2月5日第63页,共89页,星期日,2025年,2月5日第64页,共89页,星期日,2025年,2月5日第65页,共89页,星期日,2025年,2月5日体细胞胚再生途径的应用:第66页,共89页,星期日,2025年,2月5日引言/v_show/id_XODYyMTM0OTI=.html第67页,共89页,星期日,2025年,2月5日几种常用的培养基组分MSB5SHN6大量元素mg/Lmmol/Lmg/Lmmol/Lmg/Lmmol/Lmg/Lmmol/LNH4NO3KNO3CaCl2·2H2OMgSO4·7H2OKH2PO4NaH2PO4·H2O(NH4)2SO4KCl1650190044037017020.618.83.01.51.25250015025015013425001.12.025002004001257502546919.02830166185400463281752.946.6微量元素mg/Lμmol/Lmg/Lμmol/Lmg/Lμmol/Lmg/Lμmol/LKIH2BO3MnSO4·H2OZnSO4·7H2ONaMoO4·7H2OCuSO4·5H2OCoCl2·6H2OFeSO4·7H2ONa2-EDTA0.836.215.68.60.250.0250.02527.837.35.010092.5301.001100100753.0102.0250.0250.02527.837.34.550607.0010.110010005.0101.00.250.0215206.080603.51.00.855550.81.63.31.527.837.34.82619.55.2100100蔗糖(g/L)30203050pH值5.75.55.85.8第30页,共89页,星期日,2025年,2月5日培养基的配制培养基母液的配制①大量元素母液:即是含有N、P、S、K、Ca、Mg、Na等大量元素的无机盐混合液。由于各组分的含量较高,一般配制成10倍浓度的母液。在使用时,每配制成1000mL培养液,吸取100mL母液。在配制母液时,要先将各个组分单独溶解,然后按照一定的顺序一边搅拌,一边混合,特别要注意将钙离子(Ca++)与硫酸根、磷酸根离子错开,以免生成硫酸钙或磷酸钙沉淀。②微量元素母液:即含有B、Mn、Zn、Co、Cu、Mo、I等微量元素的无机盐混合液。由于各组分的含量低,一般配制成100倍浓度的母液。在使用时,每配制1000mL培养液,吸取10mL母液。第31页,共89页,星期日,2025年,2月5日③铁盐母液:由于铁离子与其他无机元素混在一起放置时,容易生成沉淀,所以铁盐必须单独配制成铁盐母液。铁盐一般采用螯合铁(Fe-EDTA)。通常配制成100倍(或者200倍)浓度的铁盐母液,在使用时,每配制1000mL培养液,吸取10mL(或者5mL)铁盐母液。④维生素母液:是各种维生素和某些氨基酸的混合液。一般配制成100倍浓度的母液。在使用时,每配制1000mL培养液,吸取10mL母液。第32页,共89页,星期日,2025年,2月5日⑤植物激素母液:各种植物激素单独配制成母液。一般浓度为100mg/L。使用时根据需要取用。由于大多数植物激素难溶于水,需要先溶于有机溶剂或者酸、碱溶液中,再加水定容到一定的浓度。它们的配制方法如下:2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)母液:称取2,4-D10mg,加入2mL95%乙醇,稍加热使之完全溶解,(或者用2mL1mol/L的NaOH溶解后)加蒸馏水定容至100mL。IAA(吲哚乙酸)母液:称取IAA10mg,溶于2mL95%乙醇中,再用蒸馏水定容至100mL。IBA(吲哚丁酸),GA(赤霉酸)母液的配制方法与此相同。NAA(萘乙酸)母液:称取NAA10mg,用2mL热水溶解后,定容至100mL。KT(激动素)母液:称取KT10mg,溶于2mL1mol/L的HCl中,用蒸馏水定容至100mL。BA(苄基腺嘌呤)母液的配制方法与此相同。玉米素母液:称取玉米素10mg,溶于2mL95%的乙醇中,再加热水定容至100mL。第33页,共89页,星期日,2025年,2月5日4、植物组织培养的基本步骤(1)培养材料的采集植物具有全能性的细胞:
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