意大利蜜蜂lncRNA15837的调控作用和表达模式分析.pdfVIP

意大利蜜蜂lncRNA15837的调控作用和表达模式分析.pdf

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2月February昆虫学报http://

2025,68(2):144153ACTAENTOMOLOGICASINICAdoi:10.16380/j.kcxb.2025.02.002

意大利蜜蜂IncRNA15837的调控作用和

表达模式分析

宋宇轩1,李坤泽1,臧贺1.2.3,刘小玉,吴

陶,徐细建4,刘锋4,

骆群,邱剑丰1.2.3,陈大福1-2.3,郭睿1,2.3.

(1.福建农林大学蜂学与生物医药学院,福州350002;2.天然生物毒素国家地方联合工程实验室,福州350002;

3.福建省蜂疗研究所,福州350002;4.江西省养蜂研究所,南昌330000)

摘要:【目的】本研究旨在通过解析意大利蜜蜂ApismelliferaligusticalncRNA15837的调控方式和

作用,并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和成虫不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌

Ascosphaeraapis侵染中的表达模式,为深入探究lncRNA15837的调控功能与机制提供参考和依据。

【方法】基于已获得的意大利蜜蜂7和10日龄工蜂成虫中肠高质量转录组数据,利用Miranda,

RNAhybrid和TargetScan软件预测lncRNA15837靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,再通过

Cytoscapev3.7.1软件构建并可视化竞争性内源RNA调控网

络。使用Blast工具将靶mRNA比对至GO和KEGG数据库以获得相应的功能和通路注释。通过

RT-PCR验证IncRNA15837在刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒

腺)中的表达。利用RT-qPCR检测lncRNA15837在工蜂的不同发育阶段(卵、3日龄幼虫、1和2

日龄预蛹、4日龄蛹及1,2,6,12,15和18日龄工蜂成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽

下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)和3日龄幼虫感染蜜蜂球囊菌后4,5和6日龄幼虫肠道中的

表达量。【结果】LncRNA15837可靶向ame-miR-21-x和ame-miR-0046-3p等29个miRNA,进而靶

向1559条mRNA,形成1个复杂的ceRNA网络;上述靶mRNA可注释到436个GO条目,其中114

条靶mRNA涉及139个分子功能相关条目,115条靶mRNA涉及257个生物学进程相关条目,67

条靶mRNA涉及40个细胞组分相关条目;可注释到224条KECG通路,其中28条靶mRNA注释

到内吞、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路,以及157条靶mRNA注释到JAK-STAT,Toll和Imd,

NF-kappaB和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;lncRNA15837在工蜂卵、幼虫、预蛹、和成

虫中差异表达,在1日龄预蛹中的表达量最低,而在3日龄幼虫中的表达量最高;lncRNA15837在

刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮中均有表达但表达量存在差异,在脂

肪体中的表达量最低,而在毒腺中的表达量最高;相较于未接种对照组,lncRNA15837的表达量在

蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼虫肠道中表达量上调,在5和6日龄幼虫肠道中显著上调。【结论】意

大利蜜蜂lncRNA15837通过ceRNA网络潜在调控胞吞作用、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路和

JAK-STAT、Toll和Imd、NF-kappaB和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;IncRNA15837在工蜂

的3日龄幼虫和工蜂成虫毒腺中特异性高表达;工蜂幼虫肠道中lncRNA15837的表达被蜜蜂球囊

菌侵染所激活,提示lncRNA15837是意大利蜜蜂幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染的潜在调控因子。

基金项目:国家自然科学基金面上项目32172792);国家现代农业产业技术体系专项资金(蜜蜂)(CARS-44-KXJ7);福建省自然

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