植物组织石蜡切片的制作.pptVIP

⑤调整石蜡块与刀口之间的角度与位置。修整蜡块，将刀片移近蜡块，使小蜡块的下边与刀锋平行，如不平行，可调夹物部上的螺旋。然后把它固定，再转下蜡块．呈矩形才行。只有平整的蜡块，才能切出平整的蜡带。

最后根据需要，调整控制切片厚度的机制。调度后，把它固定下来。上述四步骤完成后，就可进行切片，第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日⑦开始切片。右手握旋转轮的手柄，摇动一转就可切下一片，切下的蜡片粘在刀口上，待第二片切下时粘在一起，所以连续摇动就可将切下的蜡片连成一条蜡带。这时左手就可持毛笔将蜡带提起，边摇边移动蜡带。转速为每分钟40-50为宜。第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日⑧切成的蜡带到20-30厘米时，即以右手用另一只毛笔轻轻将蜡带挑起，平放在黑电光纸上。靠刀的一面较光滑，应向下，较皱的一面向上。⑨切下的蜡片是否良好，此时应先行检查。⑩切片工作结束后，仍将刀片用具擦拭干净。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日3．贴片：贴附牢固，在染色时不易脱落；是皱褶的蜡片伸展平整。用具：载玻片、粘片剂、解剖刀、蒸馏水、展片机及铐片机。 第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的1．熟练掌握石蜡切片的方法。2．掌握永久制片的制作过程，为研究植物的内部结构奠定基础。3．学会植物内部结构的比较研究方法。第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日二、实验器具与试剂1．器具石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。2．试剂10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日三、实验材料幼嫩植物各部分，根据季节选择材料。

第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日四、实验内容与方法石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种方法。它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片机切片，可以切出很薄的切片。凡是精细的工结构，大都用石蜡切片。全都过程如下：第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日1．固定2．洗涤3．脱水与硬化4．脱酒精2．封埋6．切片7．粘片8．脱蜡9．染色10．脱水11.透明12．胶封第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日实验二1、石蜡切片技术—固定、染色第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的：掌握制作石蜡切片中固定、染色、返蓝的基本操作技术第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理：石蜡切片法：是用石蜡浸透到组织中，并包埋组织，然后用旋转切片机将蜡块切成切片。只是切片中最常用的一种方法。第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日三、实验用品：1．实验材料：瓜叶菊叶柄，长寿花幼茎。2．实验试剂：卡诺固定液、FAA固定液、35%酒精、50%酒精、70%酒精、83%酒精、95%酒精、100%酒精、二甲苯、中性树胶、2%氨水、爱氏苏木精染液。3．实验器具：解剖器，双面刀片，青霉素小瓶。第10页，共47页，星期日，2025年，2月5日四、实验步骤：1．取材：依据生物组织取材的各项注意事项。2．固定：卡诺固定液、FAA固定液固定24小时。3．复水：卡诺固定液（1h）→50%酒精（1h）→爱氏苏木精染液FAA固定液→爱氏苏木精染液第11页，共47页，星期日，2025年，2月5日4．染色（整染）：爱氏苏木精染液染色，染色时间视材料不同而有所不同，总之使材料最后染指红棕色为止，且内外均染色均匀。对于染不好的材料，可加长染色时间，还可通过负压，超声波加注浸剂等方法提高染色效率。时间为1-2天。第12页，共47页，星期日，2025年，2月5日5．返蓝：染好的材料，用自来水冲洗，加2%氨水使材料变为蓝色，时间也因材料的不同而有所不同，好返蓝的材料用水一洗就蓝。第13页，共47页，星期日，2025年，2月5日附：分染：番红与固绿色法

番红用l％的水溶液，固绿用0.5％的酒精液(用95％的酒精配制)，染色步骤如下：第14页，共47页，星期日，2025年，2月5日第15页，共47页，星期日，2025年，2月5日讨论和注意点：(1)用番红和固绿这个组合染成的切片，木化、栓化和角质的细胞壁，被番红染成鲜红色，纤维素的细胞璧，被固绿成绿色。就维管束来讲，木质部染红，韧皮部染绿，区别极清楚。(2)在50％酒精中脱色，需经实践，如脱色不够，绿色难得染好，脱色太过分，做出来的切片，红