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纸色谱法课程:分析制样技术主讲老师:李岩
分析制样技术色谱分离法分类纸色谱法薄层色谱法柱色谱法按固定相的形状和操作形式的不同分
基本概念01
01基本概念分析制样技术纸色谱法又称纸层析法,是根据混合物中不同组分在两相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。载体层析纸(滤纸)。固定相滤纸上的吸湿水分。流动相有机溶剂(展开剂)。故纸层析法属于液-液色谱。
层析滤纸的要求02
02层析滤纸的要求分析制样技术要求所选滤纸应质地均匀,厚薄一致。①滤纸应具有一定的机械强度,被溶剂浸湿后能站立。②滤纸纤维应松紧程度适宜,溶剂展开速度合适。③应具有一定纯度,不含杂质。④滤纸上应不含有溶于水及有机溶剂的物质。⑤
纸色谱法的原理03
03纸色谱法的原理分析制样技术有机混合物点在滤纸(载体)上,做为展开剂的有机溶剂(流动相)自下而上移动。样品混合物中各组分在水(固定相)或有机溶剂(流动相)中的溶解能力各不相同。各组分会在水与有机溶剂两相中发生溶解分配并随有机溶剂的移动而展开,达到分离的目的。
03纸色谱法的原理分析制样技术层析分离不同组分性质不同的组分分离在滤纸的不同位置上亲脂性强的成份在流动相中分配的多一些,随流动相移动的速度就快一些。亲水性强的成份在固定相中分配的多一些,随流动相移动的速度就慢一些。
操作方法04
04操作方法分析制样技术第一步配制试样溶液第二步裁滤纸第三步画圆点第四步点样第五步取展开剂第六步展开第七步显色固定相和展开剂溶剂。1.5cm×20cm长条层析纸。离滤纸末端约2cm处用铅笔。毛细管取样,轻点样于原点上,晾干,重复3~5次。斑点直径需0.5cm取展开剂,将滤纸一端浸入有机溶剂中。滤纸不可触及试管的内壁,纸条末端浸入展开剂约0.5cm,不能让试样点浸入展开剂。喷洒适宜的显色剂,使各组分显色。约2cm试样点
04操作方法原点展开后斑点展开剂前沿a1a2bAB分离示意图
实验结果05
05实验结果通常用比移值Rf衡量各组分的分离程度。RfRf=组分原点中心到展开后的斑点中心的距离a组分原点中心到展开剂前沿的距离bRf范围0~1。Rf值可作为物质定性鉴定的依据。根据不同组分比移值的差别来比较它们彼此分离的程度。Rf值相差越大,组分分离效果越好。
实验案例06
06实验案例用粉笔进行层析分离菠菜青菜用圆滤纸改进实验的实验现象
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