临床微生物检测的接种、培养、分离纯化、鉴定和保存等要点.pdfVIP

临床微生物检测的接种、培养、分离纯化、

鉴定和保存等要点

接种

将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内

的过程叫做接种。

接种和分离工

接种针、接种环、接种钩、玻璃涂棒、接种圈、接种锄、小解剖

刀。

常用的接种方法有以下儿种：

1、划线接种

这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移

动，就可达到接种的作用。常用的接种工有接种环，接种针等C在

斜面接种和平板划线中就常用此法。

2、三点接种

在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板

表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、

研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。

3、穿刺接种

在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种

时，用的接种工是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的

做法是：用接种针蘸取少量的菌和I沿半固体培养基中心向管底作直

线穿刺，如某细菌有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。

4、浇混接种

该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°

c左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。

待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。

5、涂布接种

与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌

液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均

匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。

6、液体接种

从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养

物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液

移至固体培养基中，都可称为液体接种。

7、注射接种

该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人

或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，

来预防某些疾病。

8、活体接种

活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因

为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整

个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡

胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。

注：所有接种必须无菌操作

培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工（如接种针和吸管等）

在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上,

这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌

操作。

1（）接种灭菌2（）开启棉塞3（）管口灭菌4（）挑起菌苔5（）接种

⑹塞好棉塞。

分离纯化

含有一种以上的微生物培养物称混和培养物（mixed

culture）o如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那

么这个菌落称纯培养p（ureculture）o在进行菌种鉴定时，所用

的微生物一般均要求纯的培养物。得到纯培养的过程称分离纯

化，方法有许多种。

1、倾注平板法

首先把微生物