第六章高效液相色谱分析法第二节高效液相色谱仪器81课件.ppt

*液相色谱仪（自动进样器）自动进样器**3.分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。液相色谱的色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成。其内径为2~6mm，柱长为10~50cm，柱形多为直形，内部充满固定相微粒。柱温：一般为室温或接近室温。趋势：减小填料粒度和柱径，以提高柱效。**4.检测器检测器是液相色谱仪的关键部件之一。(1)对检测器的要求：灵敏度高，重复性好、线性范围宽以及对温度和流动相流量的变化不敏感等。(2)两种类型的检测器：①选择型检测器：仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。如紫外、荧光等；②通用型检测器：对试样组分和洗脱液总的物理和化学性质响应。如示差折光检测器等。*（3）常用的检测器：a.紫外检测器（UVD）应用最广，对大部分有机化合物有响应。特点：灵敏度高；线形范围高；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。*光电二极管阵列检测器（PDAD）紫外检测器的重要进展；光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，记录全紫外波段上的色谱信号，计算机快速处理，三维立体谱图，可以得到待测组分的光谱定性信息。**第六章

高效液相色谱分析法一、高效液相色谱仪HPLC二、高效液相色谱法的特点featureofHPLC三、流程及主要部件generalprocessandmainassemblyofHPLC第二节

高效液相色谱仪器highperformanceliquidchromatographinstrumentofHPLC*高效液相色谱仪1——Agilent安捷伦*高效液相色谱仪2——岛津**高效液相色谱仪3——Waters沃特世*一、高效液相色谱法的特点特点：高速、高效、高灵敏度；适用范围：高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。您轻松完成实验室分析工作从LC-16开始…**Essentia始于科技终于简便泵单元自动进样器在线脱气机溶剂托盘紫外检测器柱温箱手持控制器*二、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC(一)流程高效液相色谱仪：高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成。***(二)主要组成部分1.高压输液系统高压输液系统由溶剂（流动相）贮存器、高压泵、梯度洗脱装置和压力表等组成。（1）溶剂贮存器：溶剂贮存器容量一般为1~2L，用来贮存足够数量、符合要求的流动相溶剂；*流动相类别按极性：极性、弱极性、非极性；按使用方式：固定组成洗脱（等度洗脱）和梯度洗脱。常用溶剂：甲醇、乙腈、水、己烷、丙酮、乙醇、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯等。*流动相的过滤经0.45μm的微孔滤膜过滤，再脱气15min。流动相过滤装置：真空过滤、在线过滤真空过滤装置0.45μm的滤膜（有机相、水相）流动相（溶剂）*流动相的脱气流动相脱气装置：超声波脱气、在线真空脱气超声波脱气*在线真空脱气排气阀*在线真空脱气排气阀*（2）高压输液泵：关键部件之一作用：将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。由于液相色谱所用色谱柱内径较细，固定相粒度很小，因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过色谱柱，就需要高压泵注入流动相。对泵的要求：输出压力高、流量范围大、流量稳定、无脉动、耐腐蚀等特性，流量精度和重复性为0.5%左右，还应密封性好。*流动相组成：改变流动相的组成，流动相的极性改变，改善分离效果。*在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。常用溶剂的极性顺序：水(最大)甲酰胺乙腈甲醇乙醇丙醇丙酮二氧六环四氢呋喃甲乙酮正丁醇乙酸乙酯乙醚异丙醚二氯甲烷氯仿溴乙烷甲苯CCl4CS2环己烷己烷*(3)梯度洗脱装置梯度洗脱：将两种或两种以上不同的溶剂按一定比例混合，作为流动相，使流动相的极性、pH或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分析时间的目的。*梯度洗脱：实质：通过不断地变化流动