动物细胞融合与单克隆抗体.pptxVIP

“番茄—马铃薯”理想图通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。

植物体细胞杂交技术过程杂种植株融合的原生质体AB再生出细胞壁脱分化愈伤组织再分化植物细胞的融合植物组织培养植物细胞A原生质体B原生质体A杂种细胞AB去壁去壁人工诱导方法？促进融合的方法？融合完成的标志植物细胞B

成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出现自然界没有的新品种。未解决的问题：未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良。成果和未解决的问题

如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！动物细胞也能融合吗？

细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒一、动物细胞融合

不同DNA的两个细胞灭活病毒诱导细胞融合融合后的细胞进行有丝分裂动物细胞融合过程

无需，因为动物细胞无细胞壁去壁酶解法，如纤维素酶或果胶酶植物体细胞杂交前做何处理？怎么处理？动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？思考题

4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法？能还可以利用灭活的病毒进行诱导5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？思考题

01.动物细胞融合的概念02.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。

思考题你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？生产单克隆抗体

诱导剂：仙台病毒、聚乙二醇

诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。

思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？细胞融合技术应用于哪些方面？因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。2341细胞融合与融合诱导细胞融合物质：

二、单克隆抗体提问1.抗体是由何种细胞产生的？2.如何得到抗体？

二、单克隆抗体抗体1、抗原动物体内刺激浆细胞抗原动物体内刺激浆细胞抗体抗原不纯抗体不纯筛选单一浆细胞不能增殖产生大量抗体2、特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏

二、单克隆抗体设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？杂种细胞

二、单克隆抗体诱导其融合的方法有哪些？01抗原02浆细胞03制备过程：04

杂种细胞细胞融合后培养液中有几种细胞？BBBB瘤瘤瘤瘤筛选（特定的选择性培养基）

整个制备过程要经过几次筛选?（第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）

01生物导弹02特异性高、灵敏度高等优越性。作为诊断试剂用于治疗疾病和运载药物3.单克隆抗体的应用：

植物、动物细胞融合的比较主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案3、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1、该实验方案的目的是__________2、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______4、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

AC培养基成分不同动物细胞培养不需要在无菌条件下进行动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是01原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞动物细胞