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尿液生化检查
一、尿干化学法评价
生化检查包括蛋白、糖、酮体、胆红素和尿胆原、隐血试验、白细胞、亚硝酸盐试验、
尿比密检验、尿酸碱度(pH)检验和维生素C。尿十项(—),排除泌尿系统疾病;
尿蛋白、隐血、WBC、亚硝酸盐中任一项(+),需显微镜检查等确认。尿干化学法是
泌尿系统疾病的过筛试验。
二、尿蛋白检验
(一)干化学法
1.检验原理测定基于“指示剂蛋白误差”原理,即蛋白可以改变某些酸性指示剂的
颜色而不会改变pH值。溴酚蓝(指示剂)经缓冲后pH值为3,在没有蛋白存在的溶液
中为黄色。蛋白质能与溴酚蓝起颜色反应,如果尿液中有蛋白,则颜色根据浓度情况变为绿
色或蓝色,蛋白质含量的多少与颜色深浅成正比。
2.方法学评价该方法对白蛋白比球蛋白敏感,测量球蛋白的敏感性仅是白蛋白
1/100~1/50,尿液中球蛋白常不易被检测,因此如果是以球蛋白为主的蛋白尿,如非选
择性蛋白尿和本周蛋白尿可出现假阴性结果。这时最好使用磺柳酸法和双缩脲法进行定性试
验或定量测定。
试纸法测定尿蛋白操作简单快速、敏感性高,但在使用中应注意:①尿液必须新鲜,
变质的尿液产生pH变化影响试验结果,可能产生假阳性;②病人服用奎宁和嘧啶等药物引
起的强碱性尿时,会出现假阳性结果。鉴别方法是用稀醋酸将尿液pH值调至5~7,再
行实验,借以区别是否由于强碱性尿而导致的假阳性;③许多药物可影响尿蛋白检查的结果,
例如大剂量青霉素可使之产生假阴性结果;④标本内含有其他分泌物或含有较多细胞成分
时,可引起假阳性。
所以,NCCLS建议磺柳酸法作为模块检测尿蛋白的参比方法。
(二)传统尿蛋白检验
1.定性试验常用的有加热醋酸法和磺基水杨酸法等。
(1)加热醋酸法:原理是加热煮沸使蛋白变性、凝固,然后加酸使尿pH接近蛋白
质等电点(pH4.7),有利于已变性蛋白下沉,同时可消除尿液中某些磷酸盐因加热析出
所致的混浊。此方法干扰因素少,但如加酸过少或过多,都会导致远离等电点,使阳性减弱。
如尿中盐浓度过低,也可出现假阴性。本法检测尿蛋白的敏感度为0.15g/L。
(2)磺基水杨酸法:原理是在略低于蛋白质等电点的pH条件下,带有正电荷的氨
基与带有负电荷的磺基水杨酸根相结合,形成不溶性蛋白质盐而沉淀。此方法操作简单,白
蛋白、球蛋白和本周蛋白均可发生反应。但当患者使用青霉素钾盐、SMZ、PAS和有机碘
造影剂后,或在高浓度尿酸、草酸盐及黏蛋白等情况下均可发生假阳性,但加热煮沸后消失,
有别于蛋白尿。本法检测尿蛋白的敏感度为0.05~0.1g/L。
2.定量测定有多种方法,如沉淀法、比浊法(磺基水杨酸-硫酸钠法)、比色法
(双缩脲法)、染料结合法(考马斯亮蓝法、丽春红法、溴酚蓝法和邻苯三酚红钼法)和免
疫测定法等,可根据实验室条件进行选择。
三、尿糖检验
1.干化学法检验原理干化学法检测尿糖只针对尿液中的葡萄糖,而不像传统的斑
氏法(硫酸铜法)还可与其他糖分进行反应(如果糖、乳酸、戊糖等)。干化学测定尿糖的
原理是基于葡萄糖氧化酶法,即葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和过氧化氢,后者
再由过氧化氢酶催化释放出新生态氧(O),使色源呈现不同的颜色变化。反应式如下:
葡萄糖+氧(空气中)——葡萄糖酸+过氧化氢
过氧化氢+显色集团——显色氧化物+水
2.方法学评价此法优点在于特异性强,只与葡萄糖反应。灵敏度高,葡萄糖含量为
0.3~0.5g/L即可出现弱阳性。但是尿液内含有对氧亲和力较强的还原性物质(如维
生素C)可与干化学法试纸上的试剂发生竞争性抑制反应呈假阴性。此外当尿糖浓度较低
时(例如低于14mmol/L)可造成假阴性结果。
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