早期高分化型胃癌的免疫组化染色.docxVIP

早期高分化型胃癌的免疫组化染色 关于癌症组织的分类研究很多。中村分类分为两类：分离型和非分离型。分化型包括高分化型和中分化型，非分化型包括低分化型和印界细胞癌。分化型胃癌是在肠上皮化生黏膜基础上发生的,而未分化型胃癌是在胃固有黏膜基础上发生的。近年来对胃癌组织黏液及酶类研究发现,在肠上皮化生黏膜基础上发生的胃癌大多数为分化型胃癌,少数为未分化型胃癌,它们多数是以分化型胃癌形式发生的,在其增殖过程中演变为未分化型胃癌。另一方面由胃固有黏膜为基础发生的胃癌大多数是未分化型胃癌,并且发生之初即为未分化型胃癌,少数为分化型胃癌。p53基因在胃癌中突变的研究很多,我们应用常规苏木精-伊红、免疫组化、p53基因蛋白免疫组化染色方法,对50例早期高分化型胃癌组织学分类与p53基因关系进行研究,现将结果报道如下。 数据和方法 一、 早期高分化型肺癌标本 收集1981年4月～1998年12月日本国新泻大学医学部第一病理学讲座外科手术切除的早期高分化型胃癌标本50例,男37例,女13例,平均年龄67.7岁,其中微小胃癌32例(最大直径小于5 mm)。50例中黏膜内癌(m癌)35例(m1癌8例,m2癌13例,m3癌14例);黏膜下层癌(sm癌)15例(sm1癌7例,sm2癌4例,sm3癌4例)。 二、 免疫染色染色 所有标本均经甲醛固定,石蜡包埋后,连续切6片,每片厚度为3 μm,经常规苏木精-伊红、特殊黏液、免疫组化染色来判定癌细胞的性质,同时免疫染色前所有标本均经微波处理。①ConA-Ⅲ(paradoxical concanabalin A-Ⅲ)染色;②45M1(human gastrin mucin,1∶50, Novo Castra, UK)免疫染色;③GOS(galactose oxidase-schiff)染色;④HID-AB(high iron diamine-alcian)染色;⑤MUC-2(Ccp 58,mouse monoclonal,1∶100,Novo Castra,UK)免疫染色;⑥CD10(56C6,mouse monoclonal,1∶40,Novo Castra,UK)免疫染色;⑦p53基因蛋白免疫染色(Pab1801,mouse monoclonal,1∶200, Oncogene Science,USA)。 三、 分离的ype类型 分化型胃癌组织学分类标准按渡■标准判定,共分四型:①胃型分化型胃癌(gastric phenotype carcinoma,G型),腺窝上皮型(foreolar type,F型),幽门腺型(pyloric mucosel type,P型);②肠型分化型胃癌(intestinal phenotype carcinoma),包括完全肠型(complete intestinal type,C型),不完全肠型(incomplete intestinal type,I型);③混合型分化型胃癌(compound phenotype carcinoma,C型),即胃肠混合型;④不能分类型胃癌(unclassified phenotype carcinoma,U型)。 1. 细胞表面是否发生cha-阳性运营 ①ConA-Ⅲ染色为阳性黏液时判定为幽门腺型分化型胃癌(正常幽门腺细胞,颈黏液细胞的细胞质为阳性,单纯细胞表面糖衣染色阳性时,则判定为阴性,这是因为该细胞表面不产生ConA-Ⅲ阳性黏液,而细胞表面ConA-Ⅲ阳性黏液可能是附着造成的);②45M1免疫染色阳性黏液时判定为腺窝上皮型分化型胃癌(正常胃的腺窝上皮为阴性,阳性黏液在细胞浆内为弥漫性分布,在核上部高尔基复合体内可见呈点状阳性物质存在),而正常杯状细胞45M1染色也为阳性,故应结合同一平面苏木精-伊红切片标本判定为肠型分化型胃癌,另外45M1染色阴性时仅有GOS染色阳性黏液的情况,也可诊断为腺窝上皮型分化型胃癌。 2. 免疫染色阳性诊断 ①常规苏木精-伊红有杯状细胞(45M1免疫染色阳性的杯状细胞)和Paneth细胞时判定为肠型分化型胃癌;②MUC-2免疫染色阳性时判定为肠型分化型胃癌;③CD10免疫染色为阳性的刷状缘判定为完全肠型分化型胃癌;④HID-AB染色为阳性时,判定为肠型分化型胃癌(完全肠型与不完全肠型区别在于前者CD10阳性,后者为阴性)。 3. 型钢分化型肺癌细胞的检测方法 在同一病灶内同时有胃型分化型胃癌染色ConA-Ⅲ阳性或45M1染色阳性,以及肠型分化型胃癌的杯状细胞,paneth细胞,MUC-2染色阳性,CD10染色阳性或HID-AB染色阳性即判定为混合型分化型胃癌。 四、 蛋白阳性细胞的分离和表达 为了检查p53基因蛋白的过度表达,我们采用p53基因蛋白免疫染色法,先用微波处理,然后用SAB法处理。p53基因蛋白阳性