SN_T 2730-2010进出口食品中诺如病毒检测 酶联免疫吸附法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2730—2010进出口食品中诺如病毒检测酶联免疫吸附法Detection of norwalk virus in food for import and export-Enzyme linked immunosorbent method2010-11-01发布2011-05-01实施中华人民共和国发布尊国家质量监督检验检疫总局码防 中华人民共和国出人境检验检疫行业.标准进出口食品中诺如病毒检测酶联免疫吸附法SN/T 2730--2010*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 880×1230 1/16 印张 0.5字数 8 千字2011年4月第一版2011年4月第一次印刷印数 1-1 600书号：155066·2-21805 SN/T 2730—2010前本标准按照GB/T 1.1--2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：王芳、于杰、丁健、薛仲良、李荣娟、付海滨、李俊环。 SN/T 2730--2010进出口食品中诺如病毒检测酶联免疫吸附法1范围本标准规定了进出口食品中诺如病毒的酶联免疫吸附试验检测方法。本标准适用于进出口贝类、鱼类、禽肉及其加工品的诺如病毒筛选检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1诺如病毒norwalk virus冠状病毒科,杯状病毒属，电镜下观察，无明显形态特征,形态微小，圆形，无包膜，单股正链 RNA病毒。抽样和制样4.1检验批以不超过100 t为一检验批，同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标准、产地、季节和规格等。4.2抽样数量按各检验批的数量，依表1抽取样品，如为散装的应均匀抽样。表1抽样点(件)数检验批的数量混合样品数抽样点(件)数t21010 以下31511~5032051～1004.3抽样方法按4.2规定的抽样点(件)数，随机抽取样品。每5点(件)抽取的原始样品组成一个混合样(即检验1 SN/T 2730—2010样品）。其质量不少于2kg，装人清洁容器内，加封标记后，及时送交实验室检验。4.4·分析样品的采集分析样品要有充分的代表性，依受检品种决定样品的采集量。取样个数不少于12个个体，即从2kg混合样品中挑选良好的个体，去壳、皮后肉量应达200g。对于个体过小的品种，则以去壳、皮后肉量不少于200g来决定采集个数。新鲜样品不能及时送检，按4.5方法处理样品，将沥水后的200g样品置于4℃冷藏保存(切勿冷冻），备检。4.5试样制备4.5.15牡蛎、蛤及贻贝用清水将贝壳外表彻底洗净，坳断闭壳肌，开壳，用重蒸馏水淋洗内部去除泥沙及其他外来物。将闭壳肌和连接在胶合部的组织分开仔细取出贝肉，切勿割破肉体。开壳前不要加热或用麻醉剂。收集约 200 g肉置于筛子中沥水 5min(不要使肉堆积),检出碎壳等杂物,将贝肉均质。4.5.2扇贝取可食部分用作检测。沥干及均质过程同.3贝类罐头将罐内所有内容物(肉及液体)入均质器充分均质。如果是大罐将贝肉沥水并收集沥下的液体，分别称量，将固形物和汤汁按比例(1：1)混合，充芬均质。4.5.4用酸保存的贝肉，将沥丰的贝肉充分均质。沥去酸液，分别存放贝肉及酸液4.5.5冷冻贝类在室温下，使冷冻的样品（带壳或脱壳的)半冷冻状态，按套.5.1方法开壳、淋洗、取肉、均质。4.5.6虾类用清水将虾外表彻底洗净，剥考虾头、皮和腿，用重蒸馏水淋洗内部去除泥沙及其他外来物，均质。4.5.7鱼类用清水将鱼外表彻底洗净，剥去内脏、头、鳃和皮，用重蒸馏水淋洗内部去除泥沙及其他外来物，均质。4.5.8禽肉类新鲜禽肉用清水淋洗表面,再用重蒸馏水淋洗,均质。4.5.9加工品蒸煮后冷冻或鲜冻品,在室温下,使冷冻的样品呈半冷冻状态，使用 4.5.1～4.5.8的方法取试样，均质。4.6试样保存上述4.5中经均质处理的样品如不能及时检测，可取100g已均质试样置于4℃冷藏保存（尽可能2 SN/T 2730—2010及时检验)。5 测定方法5.1原理本方法使用双抗体免疫夹心法，特异性检测I型(GG1)和Ⅱ型(GG2)诺如病毒。5.2试剂和材料除另有规定外，所有化学试剂均为分析纯或生化试剂，水为按照GB/T6682（分析实验室用水规格和试验方法)规定的一级水。5.2.1以抗诺