SNT 2225-2008进出口动物源性食品中硫普罗宁及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2225—2008进出口动物源性食品中硫普罗宁及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of tiopronin and its metabolites residues infoodstuffs of animal origin for import and export--LC-MS/MS method2008-11-18 发布2009-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局R数码防伪 SN/T 2225—2008言前本标准的附录 A、附录 B、附录 C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、中华人民共和国湖北出人境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：徐锦忠、林宏、张晓燕、丁涛、黄娟、刘艳、张婧、戴华、胡小钟、林维宣、吴斌、蒋原、陶宏锦。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2225--2008进出口动物源性食品中硫普罗宁及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口动物源性食品中硫普罗宁及其代谢物2-巯基丙酸残留量测定的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于进出口牛肉、牛奶，牛肝及牛肾中硫普罗宁及其代谢物 2-巯基丙酸残留的测定和确证。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008,ISO3696:1987,MOD)3方法提要试样中残留的硫普罗宁及其代谢物在三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸二钠(Tris-EDTA)缓冲体系中用丙烯酸甲酯衍生化，调节pH值后，用乙酸乙酯提取，再经阴离子固相萃取小柱净化，用液相色谱-串联质谱进行定量和确证，外标法定量。4试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的级水。4.1甲酸:HPLC级。4.2甲醇:HPLC级。4.3乙腈。4.4乙酸乙酯。4.5盐酸。4.6三氯乙酸。4.7三羟甲基氨基甲烷(Tris):生化试剂。4.8丙烯酸甲酯。4.9二水合乙二胺四乙酸二钠（EDTA）。4.101 mol/L盐酸溶液：量取40mL浓盐酸，用水稀释至500mL。4.117%丙烯酸甲酯乙腈溶液:量取7mL丙烯酸甲酯加人93 mL乙腈中混匀。4.125%甲酸甲醇溶液:量取5 mL甲酸加人95 mL甲醇中混匀。4.1340%甲醇水溶液：量取 40 mL甲醇加人60mL水中混匀。4.14　Tris-EDTA缓冲溶液：称取 ６ g Tris 和 0.93 g EDTA 溶于 400 mL 水中，用1 mol/L 盐酸(4.10)调 pH 到 9.1后稀释至500 mL。4.1520%三氯乙酸溶液:称取20 g三氯乙酸加人80 mL水中溶解混匀。4.16阴离子交换萃取小柱：混合型阴离子交换填料（MAX），60mg/3 mL或相当者。1 SN/T 2225—20084.17硫普罗宁(CAS号：1953-02-2,分子式：CsHNO;S)标准品，纯度大于等于 99.0%。4.182-巯基丙酸(CAS号:79-42-5,分子式:C:H.O,S)标准品，纯度大于等于 99.0%。4.19标准储备液：准确称取适量的硫普罗宁及其代谢物，分别用甲醇分别配制成1 mg/mL的标准储备液，一20℃避光保存。再用乙睛稀释配制1.0 μg/mL的混合标准溶液，4℃避光保存。有效期1个月。4.20空白样品提取液：用不含硫普罗宁及其代谢物的样品，按照7.1和7.2制备空白样品溶液。标准工作溶液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成 10 ng/mL、20ng/mL、4.2150 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL的混合标准工作溶液，现配。4.22滤膜:0.45 μm,有机相。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱联用仪配有电喷雾（ESI)源。5.2分析天平：感量0.1mg,0.01,g。5.3涡旋混合器。5.4 离心机:5 000 r/min。5.5无油真空泵。5.6旋转蒸发仪。5.7固相萃取装置。5.8高速均质器。5.9氮气吹干仪。5.10超声波发生器。6试样制备和保存牛肉、牛肝和牛肾取样品中有代表性的约500g,用组织捣碎机捣碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识，于一18℃冰箱内保存牛奶：取有代表性样品约50gg，搅拌均匀居装