WST 47-1996尿中硒的氢化物发生—原子吸收光谱测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中硒的氢化物发生-原子吸收WS/T 47-1996光谱测定方法Urine-Determination of selenium-Hydride generation-atomic absorption spectrometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中硒的氢化物发生原子吸收光谱测定方法。本法最低检测浓度为0.7μg/L。本标准适用于正常人和接触硒工人尿中硒的测定。2原理尿样用混合酸消化，以破坏有机物。加人硼氢化钠，产生硒化氢，输送到火焰燃烧器上的石英管中，在196.0nm波长下用原子吸收光谱法测定硒的含量。3仪器3. 1原子吸收分光光度计。配备石英管原子化器。3. 2氢化物发生系统。3.3硒空心阴极灯。3.4记录仪或微处理机。3. 5控温电热板。3. 6烧杯，50mL。3. 7 表面血，直径5cm。3.8水浴锅。3. 9刻度试管，25mL3. 10聚乙烯塑料瓶，50mL。3. 11尿比重计。3.12玻璃和塑料器皿均用(1十1)硝酸溶液浸泡过夜，冲洗干净，晾干后备用。4 试剂本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1实验用水：去离子水，或用全玻璃蒸馏器重蒸所得的水。4.2硝酸，P20=1.42g/mL，高纯。4.3硫酸，P20=1.84g/mL，优级纯。4.4高氯酸，P2=1.75g/mL，高纯。4.5盐酸，P20=1.19g/mL，高纯。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施 WS/T 47--19964.6氢氧化钠。4.7硼氢化钠(NaBH4）。4.8二氧化硒（SeOz），高纯。4.9盐酸溶液，10%(V/V)。4.10盐酸溶液，6mol/L。4.11硼氢化钠溶液，1%：称取10g硼氢化钠和1g氢氧化钠，用水溶解并稀释至1000mL。4.12混合酸，硝酸十硫酸+高氯酸=3+1+1。4.13硒标准溶液：称取0.1405g二氧化硒，溶解于10mL水中，加1mL硝酸，用水稀释至100mL，混匀。此溶液为1mL=1000μg硒标准储备液。临用前，用此溶液逐级稀释成1mL=0.5μg硒标准应用液。4.14质控样：用标准尿样、加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和贮存用塑料瓶收集一次晨尿，混匀测定比重。取25mL尿放入50mL塑料瓶中，加0.25mL硝酸，可在室温下尽快运输，于4C下至少可以保存14天。分析前要将尿样彻底摇匀。6分析步骤6.1仪器操作条件参照下列仪器操作条件，将原子吸收分光光度计调节到最佳测定状态。2.0L/min波长196.0nm乙炔流量0.2L/min1.3nm氩气流量狭缝10mA9.5L/min空气流量灯功率20s45s计算时间取样时间6.2样品处理取2mL尿样于50mL烧杯中，加人2mL混合酸，盖上表面皿，置电热板上，在200℃士10C下加热消化，待冒白烟后立即取下，冷却后，用6mol/L的盐酸溶液定量转移到25mL刻度试管中，并加同一盐酸溶液至刻度，混匀，于沸水浴锅中加热30min。6.3空白试验取2mL水代替尿样，按6.2条步骤处理。6.4标准曲线的绘制6.4.1取6个烧杯，按下表配制标准管。尿硒标准管的配制235014管号40608001020硒标准溶液（4.13），μL2. 02. 02. 02. 02. 02. 0正常人混合尿，ml10.015. 020. 002. 55. 0硒浓度，ug/L.6.4.2将氢化物发生系统相应的吸液泵分别插人6.4.1、10%的盐酸溶液和1%硼氢化钠溶液中，参照6.1条件，启动氢化物发生系统，自动吸入样品、盐酸溶液和硼氢化钠溶液于混合反应管中。产生的硒化氢用氩气输送到乙炔-空气火焰上的石英管中进行测定，6.4.3以加入标准的硒浓度为横坐标，测得的峰高值减去对照样的峰高值作为纵坐标，绘制标准曲线。6.5样品测定6.5.1将处理好的样品（6.2)与空白管（6.3)一起按6.4.2进行测定。6.5.2将测得的吸收峰高值减去空白吸收峰高值后，由标准曲线查得尿样中硒的浓度。 WS/T 47--19967 计算7.1按式（1)计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数(k）。1.020—1.000k=(1)实测比重-1.0007.2按式(2)计算尿中硒的浓度。X=c·k(2)式中：X--尿中硒的浓度,μg/L。一一由标准曲线查得的硒浓度，g/L。c8说明8.1本法的最低检测浓度0.7μg/L；尿样测定精密度CV=1.9%～6.7%（n=6）；尿样加标回收率90%～108%，能准确地测定人尿标准样品。8.2采样问题：硒的生物半衰期较长，最好采集晨尿，以避免污染。尿样采集后立即以100：1(V/V)加入硝酸（4.2），在4C至少可以保存14天。8.3影响测