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微生物的生长及其控制;;;;(一)．固体稀释法 样品材料稀释，倾入平板或表面涂布，在浓度比较低的平板上可得到单菌落。 ;1ml ;（二）划线分离法 方法简便，用于微生物纯化、分离 并非所有的菌都能在培养基上生长 ，分离的为实际的10%）;;;（三）单细胞挑取法 显微镜下操作 （四 利用选择性培养基分离法等。 有目的选择某种微生物 ;二. 微生物生长的测定; 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10%—20%，而一个细菌细胞一般重约10-12—10-13g。 该法适合菌浓较高的样品。 ;（一）测生长量;（二）???? 计繁殖数 ;?2、间接法： （1）平板菌落计数法（活菌） 好氧菌使用较好 操作同稀释分离过程 计数结果比直接计数低 操作烦琐 ;;?2、间接法： （2）液体稀释法（半固体深层琼脂法） 一些厌氧菌在普通平板生长不好，可以用液体稀释法 液体样品10极差稀释 ;第二节 微生物的生长规律;一、微生物液体培养中同步生长;进行同步分裂的细胞称为同步细胞。 同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一相，彼此间形态、生化特征都很一致，因而是细胞学、生理学和生物化学等研究的良好材料。;二、单细胞微生物的生长曲线;;;（一）延滞期 lag phage ;;3、对生产的指导意义;（二）指数期 ;;（二）指数期;（4）培养温度 大肠杆菌 10℃ 代时860分， 15℃ 代时120 分， 40℃ 代时17.5分 指数期因微生物生理特性较一致，生长速率恒定是好材料，为最佳种子。 ;应用意义： ;（三）稳定期 ;（三）稳定期 ;（三）稳定期 ;应用意义：;（四）衰亡期;四、大规模工业发酵生产;分批培养（batch culture） ：将微生物置于一定容积的定量的培养基中培养，培养基一次性加入。不再补充和更换，最后一次性收获。 连续培养（continuous culture） ：在微生物培养的过程中，不断地供给新鲜的营养物质，同时排除含菌体及代谢产物的发酵液，让培养的微生物长时间地处于对数生长期，???利于微生物的增殖速度和代谢活性处于某种稳定状态。 ;（一）恒浊连续培养法;使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。;概念：以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。 原理：通过控制某一种营养物浓度（如碳、氮源、生长因子等） ，使其始终成为生长限制因子，而达到控制培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖。 特点：维持营养成分的亚适量，控制微生物生长速率。菌体生长速率恒定，菌体均一、密度稳定，产量低于最高菌体产量。 ;（三）连续培养优缺点;（三）连续培养优缺点;第三节 影响微生物生长的几个环境因素;一、温度对微生物的影响;;温度对微生物生长的影响机理;微生物三个类型 ;微生物高温下能生长的原因 ;嗜冷微生物在低温下生长的机理 ;高温对微生物的影响 ;低温对微生物的影响 ;二、氧气对微生物生长的影响;厌氧菌的氧毒害机制—— SOD学说：;三、pH对微生物生长的影响;三、pH对微生物生长的影响;一些微生物生长的pH值范围;;;;第三节 环境因素对微生物的影响 ;几个基本概念;温度是影响微生物生长的最重要因素之一。 温度对微生物的影响具体表现在： 影响酶活性，温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性，温度高，流动性大，有利于物质的运输，温度低，流动性降低，不利于物质运输，因此，温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度，对生长有影响。;从微生物整体来看: 生长的温度范围一般在-10 ℃ ~100 ℃ 极端下限为-30 ℃，极端上限105~300 ℃ 但对于特定的某一种微生物： 只能在一定温度范围内生长，在这个范围内，每种微生物都有自己的生长温度三基点，即最低、最适、最高生长温度;;根据微生物的最适生长温度的不同，可将微生物划为三个类型： ;微生物对氧的需要和耐受力在不同的类群中变化很大，根据微生物与氧的关系,可把它们分为几种类群: 专性好氧菌: 好氧菌 微好氧菌： 兼性厌氧菌