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第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 3 页 一、 实验室考勤制度 1.周一至周五每天8:00到实验室,16:50下班;离开半天须在实验室去向本上登记;离开一天须向实验室管理人员请假;两天及以上须向实验室主任请假。考勤结果将上报学院,并定期在网上公布。 2.无故迟到、早退或不去实验室累积达到3次,给予实验室警告处分,并重新学习实验室规章制度、参加准入考试,合格后方可重新开通门禁。 3.严禁代替他人打卡,违者双方均给予实验室记过处分。 实验室门禁制度 1.研究生进入实验室前须先申请,然后进行实验室规章制度及实验操作培训,培训结束经理论及实践考试合格后,方可开通大门门禁。如培训缺席或考试不合格,不予以开通门禁。 2.不同的课题组成员按实验需要给予不同的权限,非权限区不准擅自进入。如有实验需要,可向实验室管理人员申请开通权限。 3.严禁未经申请带非本室人员进入,违者给予实验室警告处分。 二、为保证重点实验室的正常实验秩序,培养实验人员的良好实验习惯,特规定实验习惯成绩总分为20分,扣除满20分者,取消实验室准入资格,并登记备案,具体规定如下: 不规范使用仪器,造成仪器设备损坏或造成安全隐患的,或擅自使用大型仪器室的设备,扣10分; 在实验室娱乐、饮食或影响他人实验的行为,扣10分; 未经批准,私自带非授权人员进入实验室进行实验,扣10分; 在实验区域未穿工作服者或穿戴手套开关门,扣5分; 未按规定处理实验废弃物或将废弃物堵塞下水道,扣5分; 随意停止他人正在进行的实验(如离心机、PCR仪等),扣5分; 长时间敞开超低温冰箱者或液氮罐或冷库者,扣5分; 仪器或会议室使用未登记和清洁整理、无故不值日者,扣5分; 出入实验室不关闭门禁,如大门、细胞房、荧光定量PCR房、P2实验室等,扣5分; 实验记录本缺失或不规范,扣5分; 三、无 四、无 五、无 六、无 七、无 八、无 九、无 十、 = 1 \* GB2 ⑴初次使用二氧化碳培养箱一定要加充足的去离子水或蒸馏水,盖上密封盖,以减少水套内水的蒸发。 = 2 \* GB2 ⑵注意二氧化碳供气必须用二氧化碳减压阀减压后输出,且压力维持在0.1MPa 内;首次使用及更换气体后,打开钢瓶气体总阀前应保证其处于关闭状态防止气体压力过大,损毁仪器。 = 3 \* GB2 ⑶当环境温度与设定温度差小于5℃时,应用空调降低周围环境温度,在培养的全过程中,应保持环境温度没有明显的变化 。 = 4 \* GB2 ⑷平时尽量避免箱门被频繁打开,以免二氧化碳浓度、温度和相对湿度发生很大的波动。 = 5 \* GB2 ⑸保持细胞培养箱内干净,并定期消毒;保持箱内相对湿度。 = 6 \* GB2 ⑹日常保养:水套的水位 、二氧化碳气瓶量、二氧化碳的供气管道和接口有无漏气现象 、机器除尘 等。 = 7 \* GB2 ⑺细胞培养箱长时间不用时,应关掉仪器,关机后将仪器内残留水抽出,清洁腔面,等培养箱干燥后再关门,防止仪器发霉 十一、第一维采用等电聚集(isoelectric focusing, IEF)电泳。当把蛋白质加人到含有pH梯度的载体时,如果蛋白质所在位置的pH值与其等电点不同,则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷,在外加强电场的作用下,蛋白分子就会分别向正极或负极泳动,直到pH值与其等电点相等的位置,蛋白质不再泳动,而浓缩成狭窄的区带,将蛋白质进行分离。 第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)。蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。SDS就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后,呈现为斑点状。 十二、 定义:以激光作为激发光源,采用光源针孔与检测针孔共轭聚焦技术,对样本进行断层扫描,以获得高分辨率光学切片的荧光显微镜系统 原理:检测针孔和光源针孔始终聚焦于同一点,使聚焦平面以外被激发的荧光不能进入检测针孔 ,从而获得高分辨率的光学切片。另外激光穿透性强,可对样本进行一定深度光学断层,获得高标准的连续光学切片,进而实现三维重建。 基本配置:荧光显微镜、共聚焦扫描及检测装置、激光光源及控制装置、防震台、计算机等 应用领域:只要目的结构是用荧光探针标记的,都可用共聚焦激光扫描荧光显微镜观察。 形态学研究:细胞凋亡、中枢神经的联系、肿瘤细胞分类…… 分子生物学:原位杂交,DNA、RNA定量,DNA损伤修复、外源性基因在真核细胞的表达、定位,荧光能量共振转移?大分子构象的改变、受体与配体相互作用…… 活细胞动态荧光测量:细胞内Ca++、K+、H+等离子的动态分布及动态定量、荧光漂白恢复?细胞连接间的信息沟通…… 直接对活组织或整体胚胎观察:单光子共聚焦激光
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