仪器分析 第十章紫外2.pptVIP

自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 （2）双光束 特点： 不用拉动吸收池，可以减小移动误差 对光源要求不高 可以自动扫描吸收光谱 1，2同步斩光器（旋转扇面镜） 3单色器出光狭缝 5，6，7，8、凹面镜 9、平面镜 10，11、参比与样品吸收池 12、光电倍增管 单波长双光束分光光度计示意图 (3) 双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 特点： 利用吸光度差值定量 消除干扰和吸收池不匹配引起的误差 三、分光光度计的校正 1、波长的校正 短波长区校正：苯蒸气吸收光谱或苯 乙醇光谱 中波长区校正：氢灯或氘灯发射谱线 常用486.13nm（F线）656.28nm（C线） 长波长区校正：镨钕玻璃的吸收光谱 镨钕玻璃滤光片的吸收光谱 λnm 3、吸收池校正 两个不同的吸收池分别装参比溶液和试样溶液，然后交换装参比和试样溶液，两次测量差值不大于1％ 2、吸光度的校正 采用铬酸钾溶液 （二）光学因素 1. 光的非单色性 光源为连续光谱时，单色器实际分离出来的光为具有一定波长宽度的光。 谱带宽度，常用半峰宽来表示，即最大透光度一半处曲线的宽度 。 单色光的谱带宽度S= 2 - 1 Beer定律只适用于单色光 照射物质的光经单色器分光后，并非真正单色光； 其波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定； 为了保证透过光对检测器的响应，必须保证一定的狭缝宽度； 这就使分离出来的光具一定的谱带宽度。 讨论： 结论： ◆ 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） ◆ 选λmax作为测定波长（ΔE↓，S↑且成线性） 入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状 λ1 λ2 λ A 测量波长选λ2 测量波长的选择 定量测量时，为有较好的灵敏度和准确度，应选择峰顶较平缓的吸收峰的最大吸收波长(λmax)作测量波长。 一些不在谱带宽度范围内的与所需波长相隔较远的光，称杂散光。 2、杂散光 杂散光的来源： 仪器保养不善，光学元件受尘染或霉蚀。 杂散光可使吸收光谱变形。也使吸光度值改变。 3、散射光和反射光 测量A值时，光强度的减弱并不完全是吸光物的吸收，还有： ①溶剂、容器的吸收 ②吸光质点的散射 ③吸收池内、外界面的反射 I I0 反射 反射 散射 4、非平行光引起偏离 非平行光会增大光通过液层的厚度，使A值偏高。 i 故：吸收池不得倾斜放置光路中 溶剂: 测定波长范围应无吸收（测定 波长要大于溶剂的极限波长） 解决办法： 吸收池:紫外光区用石英池。 用不同的吸收池测量要校正 吸收池 1.遮住光路，用电子线路调T=0% 2.入射光照射空白液，调T%=100% 3.入射光照射样品液，读T%=I / I0 % 把透过空白液的光强作为I0，基本 抵消了因界面反射、吸光质点散射 和溶剂、容器等的吸收而产生的影响。 用空白溶液补偿 1.大分子试样（胶体、蛋白质类）或浑浊试样，因质点大，散射光强，不易配制相同的空白液补尝，使透射光减弱，A值偏高 若存在以下两种情况，则不能完全用空白液补偿： 2.试样溶液与空白溶液的折射率有较大的差异 （三）透光率的测量误差——ΔT 影响测定结果的相对误差两个因素： T和ΔT ΔT影响因素：仪器噪音 1）暗噪音 2）讯号噪音 微分后并除以上式即可得相对误差为： 1）暗噪音——与检测器和放大电路不确切性有关 与光讯号无关 第二节 紫外-可见分光光度计 一、紫外-可见分光光度计光路图用主要部件 光源 单色器 吸收池 检测器 讯号处理 及显示器 go 仪器 可见分光光度计 仪器 紫外-可见分光光度计 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 1. 光源 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 back 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。 2.单色器 混合光 单色光λ1 λ2 准直镜 出光 狭缝 色散元件 进光 狭缝 图12-13 单色器光路示意图（ λ2λ1) ④聚焦装