限制性核酸内切酶的命名.pptxVIP

第一章工具酶;主要内容;一 ?限制性核酸内切酶;■定义：一类能识别双链DNA中特殊核昔酸序列,;特点:;限制性内切酶的发现:;煉慵的山H);限制和修饰作用的分子机制 ■ 1.大肠杆菌宿主细胞K株B株.有各自的限制和修饰系 统。 ■ 2.入噬菌体长期生长在大肠杆菌宿主细胞K株，B株 史. ■ 3.细菌利用限制和修饰系统来区分自身DNA与外 DNAo;问题 ■ 1 .关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有()不太 恰当。 ■ Ao由作用于同一DNA序列的两种酶构成 ■ B.这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切酶 ■ C,这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 ■ D.不同的宿主系统具有不同的限制一修饰系统 ■ 2.判断下面一句话是否正确 ■限制与修饰现象是宿主的??种保护体系，它是通过外源DNA的修饰和 对自身DNA的限制实现的。;■ 1)它们均有三个连续的基因位点控制，hsdR; hsdM; hsdS. . 2) hsdR编码限制性核酸内切酶一识别DNA分子特定位 点，将双链DNA切断。 ■(注意：DNA分子转化细胞：受体细胞去掉hsdR基因位 点) . 3) hsdM编码产物是DNA甲基化酶一催化DNA分子特定 位点的碱 .com ■ 4) hsdS表达产物的功能是…协.限制性核酸内切酶和甲 基化酶，识别特殊的作用位点。;限制和修饰作用的分子机制;限制和修饰作用的分子机制;限制性内切酶的分类:;限制性核酸内切酶;■问题： ■ 1 .下面关于限制酶的叙述中哪些是正确的？（） ■ A.限制酶是外切酶而不是内切酶 ■ B.限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割 ■ C.同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同 -D.一些限制酶在识别位点内稍有不同的位置切割双链，产生黏末端 ■ El些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA,产生平末端 ■ 2.11类限制性内切酶（） A. 有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 B. 仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 C. 限制性识别非甲基化的核昔酸序列 D. 有外切核酸酶和甲基化酶活性 E. 仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供;限制性核酸内切酶的命名;问题：;II型限制性核酸内切酶的基本识别特性;II型限制性核酸内切酶的基本识别特性;问题：;限制性内切酶的切割方式;限???性内切酶的切割方式;限制性核酸内切酶的切割方式;限制性核酸内切酶的切割方式;限制性核酸内切酶的切割方式;限制性核酸内切酶的切割方式;限制性核酸内切酶的切割方式;问题 ■ l.BamHI、Xba K Bg/II的识别位点分别是： ATCC、 TAGA 、AGATCT,哪些酶切结果可产生互补的末端？() ■ A.以上几种酶切结果产生的末端都可互补 ■ B.产生的末端都不能互补;II型限制性核酸内切酶酶解反应的操作;影响限制性核酸内切酶活性的因素;底物DNA;底物DNA;解决方法:;■ 2）内切酶的用量 ■ 反应体系中内切酶的用量主要取决于酶本身的 催化活性和底物DNA样品 ■ 当底物确定后，酶的用量视酶活性而定。酶活 性高的用量少，反之则高。;■谷积活件(volume activity );3）反应缓冲液（浓度（10X） mmol/L）;■ 4）反应温度;限制性内切酶的S阪活性;问题;■ 2.限制性内切酶的星号活性是指();其它特异性的限制酶;其它特异性的限制酶;DNA的片段化 ■定义：无论是生物材料制备的天然DNA,还是化 学合成的DNA,往往需要用限制性核酸内切酶进 行切割，使其可用于连接重组的DNA片段，即 DNA分子的片段化 ■切割方法： ■ 单酶切 ■ 双酶切;单酶切;双酶切;Sinai;部分酶切;用途;限制酶作图(Restriction Mapping)基本原理;4.9kb;如何确定哪种结论正确? 答：部分限制性酶切;酶切位点的确定line DNA W=N+1 ccc DNA W=N;酶切位点的确定;I -4— Xbo I;片段大小2450;问题;DN谜接酶;DN谜接酶;DNA连接酶的基本性质;DNA连接酶的基本性质;OH P;分类:;■连接反应是一个吸能的反应,;DNA连接酶的反应条件