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第一章 绪论;教学目标:
掌握组织培养的概念和类型及理论依据;?
掌握组织培养的特点;
了解组织培养发展史及在专业学习中的地位,树立学习本课程的信心;
初步掌握组织培养在实践上的应用。
重点难点:组织培养的概念、类型及理论依据;组织培养在社会实践中的应用。 ;§1-1 植物组织培养的含义、类型与特点;二、此定义内涵:
1、无菌条件:外植体、培养基、培养容器、接种工具、操作环境、培养环境等。
2、外植体:从健康植株的特定部位或组织,如根、茎、叶、花、???实、胚珠、花药和花粉等,选择用于组织培养的起始材料,称之为外植体。包括营养器官、生殖器官、组织、细胞等。;花(flower);果实(fruit);种子(seed);3、培养基:是植物组织培养的重要基质, 它提供植物生长所需的营养物质。人工配制,成分确定。
4、组培的理论基础:植物细胞的全能性。
5、激素 :调控培养物的状态和发育方向,实现不同的实验目的。
6、封闭培养 :通过封口材料实现气体交换。
7、培养条件:人为控制。;;;三、植物组织培养的四要素;四、与组培有关的术语;2、外植体:从健康植株的特定部位或组织,如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等,选择用于组织培养的起始材料,称之为外植体。供离体培养用的植物器官统称外植体。;3、愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
;4、分化:具有分裂能力的分生细胞停止分裂,形成具有各种特殊构造和机能的细胞组织和器官的发育过程。
5、脱分化(去分化):已经分化的细胞在一定因素的作用下,改变原来的发展方向,重新恢复分裂能力的过程。
6、再分化:愈伤组织在合适的条件下,重新分化形成具有各种特殊功能或结构的器官和组织的过程。
;分化;脱分化;再分化;7、胚状体:非合子细胞形成的胚状结构,如兰花的原球茎。
8、胚胎发生:培养物通过与正常的受精卵发育相似方式形成胚状体的过程(经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期)。;五、植物组织培养的类型(一);1、植株培养:对完整植株材料的无菌培养,如幼苗及较大植株的培养。
;2、胚胎培养:从果实或子房中分离出未成熟或成熟的胚的无菌培养。
;白菜;3、器官培养:对植物根、茎、叶、花、果实的无菌培养。(常用)
;实例:非洲紫罗兰的组织培养;4、组织培养:对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。;5、细胞培养:对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很小的细胞团的无菌培养,以获得无性繁殖系。
;6、原生质体培养:对用酶、物理等方法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原生质体团的无菌培养。;植物组织培养的类型(二);初代培养:将外植体进行的第一次培养。;继代培养;初代培养和继代培养;植物组织培养的类型(三);
固体培养:加入琼脂等凝固剂使培养基成固体状态的培养。
优点:是最常用的方法。该方法简单,易行,能较好地固定培养物。
缺点:但养分分布不均,营养成分不能得到充分利用,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。
产生的有害物质不能及时清除。;固体培养;
液体培养:在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养,由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确保氧气的供给。
往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
缺点:不能较好地固定培养物,
优点:营养成分得到充分利用,产生的有害物质能及时清除
;
液体培养:在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养,由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确保氧气的供给。
往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
缺点:不能较好地固定培养物,
优点:营养成分得到充分利用,产生的有害物质能及时清除
;液体培养;双相培养:固体、液体混合培养,协调了固体、液体培养的优缺点;六、植物组织培养的技术特点(优越性);;§1-2 植物组织培养的基本理论;
潜在全能性的原因:基因表达的选择性 。 科学研究表明,处于离体状态的植物活细胞,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程,就是植物组织培养。;植物组织培养;
3、实现全能性的条件
3.1离体条件
3.2给予适当的条件,如激素等。
;二、植物的再生性
(一)再生性(细胞全能性的实现的过程)
;植物全能性
的表达;;1、形成过程
①启动期(诱导期):细胞准备进行分裂的时期。是愈伤组织形成的起点。
长短因不同植物而不同,如与植物种类、外植体的生理状态、外部条件有关。
;②分裂期:外植体细胞经过诱
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