组织切片步骤.docxVIP

石蜡切片 1脱水 将固定的组织取出，依次经过：50%酉精（已保存在70%的洒精中可省略） t70%酉精t80%酉精t90%酉精t95%酉精T100%酉精（两次），每级 35-45分 钟，100%酉精第二次可适当缩短时间。 洒精浓度越高组织越容易变脆，时间不能太长。每次从低浓度更换到高浓度 的洒精时，要把组织块用吸水纸吸十。 2透明 100%由0卅二甲苯（1: 1 ）30-40 分钟， 二甲苯（I ） 15分钟t 二甲苯 （n） 15分钟（易脆的组织可省略）。 二甲苯的收缩性强，极易使组织变脆，透明时间根据不同的组织适当调整。 3透蜡 二甲苯 +石蜡 （1:1 ） 30分钟， 石蜡（I ） 40分钟t 石蜡（U ） 30 分钟 浸蜡是将包埋剂取代二甲苯渗透入整个组织的过程 ，通常在恒温箱中进行， 恒温箱的温度应该设置成高于石蜡熔点 2?3 C。 浸蜡的时间长短根据不同的组织器官适当调整。 4包埋 5切片 将凝固的蜡块修整成合适的方块，上下边要平行，并固定在小木块上，切片 厚度 6-12um, 一股 7-8um。 切片刀倾斜角一般以20- 30度为宜，切片时力要均匀一致，以每分钟40-50 转为宜。 夏季切片时，为保持蜡块硬度，可把蜡块放于冰柜中，切片时再取出；胶质成 分较多的组织蜡块，切片时可以用毛笔沾水往冷却过的蜡块滴加后再切片 ，以保 证切片的完整性。 如果发现切片破碎可能的原因 有：组织过硬变脆，可能是由于脱水时间不适 当，可先用温水润泽，再用冰硬化，便可较顺利地切片；也可能由于浸蜡时温度过 高，造成组织过硬。 6贴片 用洁净的纯净水（易掉片的用甘油蛋白）贴片，放在 45-50 C左右（比石 蜡的熔点略低，根据气温适当调整）左右烘片台展平，入 50 C的干燥箱中烘干 备用。 7染色 二甲苯脱蜡（I） （10-20分钟，可长时间）t二甲苯脱蜡（U） （10-20 分钟，可长时间）t以下每步2-5分钟，也可长时间 二甲苯：无水洒精1: 1t无水洒精（I） t 95 %洒精t90%洒精t 80 %洒精7 70 %洒精 t 蒸僻水t苏木精染液（20-24分钟）t自来水冲洗t蒸僻水（2-5分钟）t 1%盐酸洒精 （70%酉精+1就酸，在其中蘸取几下）（然后蒸僻水中沾洗几 次，活除盐酸，防止下一步中和碱水） t 1%碱水（3-5秒）至组织出现蓝色 （目的：显蓝）t蒸僻水（2分钟）t70%洒精（2分钟）t 80 %洒精（2 分钟）t90%洒精（2分钟）t 95% 洒精（2分钟）T0.5 — 1%勺伊红染液 复染（几秒至数分钟，根据伊红浓度和组织不同而定， 注意染色时间不能太 长,3-5秒）t 95 %洒精（I ）（分色2分钟或更长，至胞浆和结缔组织等 成桃红色）t 95 %洒精（II） （2分钟）t无水洒精（I ） （2分钟）t 无 水洒精（II） （2分钟）t二甲苯（I ） （2分钟）t 二甲苯（II） （2分钟） 不同的生物及不同的组织以及相同组织的不同生理阶段对染料的亲和力都 有差异，所以分色和蓝化时间需要摸索， 可在显微镜下观察。染色结果细胞核蓝 紫色，胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒桃红色，胞浆桃红色，弹性纤维明亮桃红 色。 8封固 中性树胶用二甲苯稀释，以能用吸管吸起为准，先将盖玻片一侧放置在滴有 中性树胶的组织切片上，随后缓慢放下并将空气完全排除，避免留下气泡。斜面放 置晾干。 9观察和照相 在显微镜下观察，对好的视野拍照，做好记录。 办公室卫生管理制度 一、 主要内容与适用范围 1本制度规定了办公室卫生管理的工作内容和要求及检查与考核。 2此管理制度适用于本公司所有办公室卫生的管理 二、 定义 1公共区域：包括办公室走道、会议室、卫生间，每天由行政文员进行清扫； 2个人区域：包括个人办公桌及办公区域由各部门工作人员每天自行清扫。 公共区域环境卫生应做到以下几点： 保持公共区域及个人区域地面干净清洁、无污物、污水、浮土,无死角。 保持门窗干净、无尘土、玻璃清洁、透明 I ■ 。 保持墙壁清洁，表面无灰尘、污迹。 4) 保持挂件、画框及其他装饰品表面干净整洁。 保持卫生间、洗手池内无污垢，经常保持清洁，毛巾放在固定(或隐蔽)的地方。 保持卫生工具用后及时清洁整理，保持清洁、摆放整齐。 7) 垃圾篓摆放紧靠卫生间并及时清理，无溢满现象。 办公用品的卫生管理应做到以下几点： 办公桌面：办公桌面只能摆放必需物品，其它物品应放在个人抽屉，暂不需要的物品就摆回柜子里，不用的物品要及时清理掉。 办公文件、票据：办公文件、票据等应分类放进文件夹、文件盒中，并整齐的摆放至办公桌左上角上。 3 ) 办公小用品如笔、尺、橡皮榛、订书机、启丁器等，应放在办公 桌一侧，要从哪取使用完后放到原位。 4) 电脑：电脑键盘要保持干净，下班或是离开公司前电脑