凯氏定氮实验操作步骤.docxVIP

取样消化蒸馏滴定计 取 样 消 化 蒸 馏 滴 定 计 算 一、 工作原理 ATN-300 型全自动定氮仪检测原理为： 整套装置，由电加热消化器、全自动蒸馏器两部分组成。要提 高蛋白质含量测定的检测速度，其关键是要加速样品消化煮解的时 间，ATN-300 型全自动定氮仪消化装置采用井式电加热炉，增大了 消化管受热面，使消化管连同管内所注入的 10ml H  2  SO  4  及试样置入 消化管插入井式炉内加热取得更佳的热效应，在消化前置入硒片作 为催化剂进一步加速消化煮解，大大缩短消化时间。消化管内溢出 的 SO2 等有害气体，通过消化管上的排污管经抽吸泵由水带入下水 道，有效的抑制有害气体的外逸，由省略了实验室中安装毒气通风 橱，试样经 40 分钟左右消化煮解，即可完全消化。 消化的过程主要反应如下： R·C·H·NH2·COOH + H  2  SO  4  → CO  2  + SO  2  + NH  3  + H  2  O 2NH  3  + H  2  SO  4  → (NH  4  )  2  SO  4 蒸馏与吸收过程的主要反应如下： (NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2NH3 + 2H2O NH  3  + 4H  3  BO  3  → NH  4  HB  3  O  7  + 5H  2  O 然后经滴定，计算蛋白质含量，滴定的过程是盐酸和硼酸氢铵反映 的过程。 NH4HB3O7 + HCl + 5H2O → NH4Cl + 4 H3BO3 二、 技术参数 ． 测定品种：粮食、食品、饲料、酿造、土壤、制糖、乳制品、 药物等物质 ． 测定样品量：固体＜5g/个，液体＜15ml/个 ． 测定范围：含氮量 0.1~200mg (0.02%~95%) ． 测定数量：消化：一次同时消化个数按炉孔数定；单个蒸馏 5． 测定时间：消化每批 45min；蒸馏每个 6min ． 测定重现性：平行试验结果符合 GB/T 6423-94 ． 电源：220V，50Hz 三、 1．  使用说明 其他仪器和用具 1．1 分析天平：感量 0.0001g 1．2 实验室用粉碎机或研钵 1．3 酸式滴定管：25ml 或 10ml 1．4 锥形瓶：容积 250ml ．5 分样筛：孔径 0.45mm(40 目) ．试剂 2. 1 盐酸(HCl)：分析纯(GB622) 0.05mol/L 标准液，(4.2ml 盐酸，注 入 1000ml 蒸馏水)碳酸钠法标定盐酸。 2. 2 氢氧化钠(NaOH)：化学纯或工业纯(GB629)、40g 溶于蒸馏水中 溶成 100ml，配成 40%水溶液(m/v)。 2.3 硼酸(H3BO3)：分析纯(GB628)2g，溶于蒸馏水中配成 100ml2%水 溶液(m/v). 2.4 混合指示剂：甲基红(G5H15N3O2)(HG3-958)溶于乙醇配成 0.1%乙 醇溶液，溴甲酚绿(HG3-1220)溶于乙醇配成 0.5%乙醇溶液，二种溶 液等体积混合，阴凉处保存(保存期三个月以内)。 2.5 硫酸铜(CuSO4·5H2O)分析纯(GB655)10g；硫酸钾(K2SO4) (HG3- 920)分析纯 150g，在研钵中研磨，仔细混匀后过 40 目筛(加速剂)。 2.6 浓硫酸(H2SO4)化学纯(GB625)(含量 98%、无氮)。 3．操作方法 3.1 样品消化 （1）磨样： 磨样机磨样，时间控制在 10s 左右，以样品粉碎不出油为佳。 称取 1g 无损的倒入洗净的消化管中。 （2）称取 6gK  2  SO  4  和 0.2g5H  2  O·CuSO  4  、0.006g 硒粉一同倒入 研钵中，研磨成细末，不得偷懒。研磨完毕后倒入消化管中。 将消化管分别放入消化架各个孔内，用 5ml 移液器小心的在每 管中滴加 15ml 浓硫酸，此步一定小心操作!！然后置于消化炉上， 开启抽气三通上连接的自来水龙头，使抽气三通处于吸气状态。接 通电源，在加热初始阶段需注意观测，防止试样因急沸而飞溅。(经 验值初始温度 100℃30min，禁止起始温度超过 120℃，然后升高温 度到 200℃20min，最后升温到 400℃。) 消化结束后（消化液呈澄清透明状），消化液澄清透明后再继续 加热 30min。关闭消化炉，将消化管架移至冷却架冷却至 40-50 度左 右。然后进行下一步的蒸馏。 3．2 蒸馏 （1）酸碱配置方法见上文。配置酸碱，尤其是配 NaOH 溶液时 切记在大量水中少量的缓慢的加入 NaOH，以防散热过大，烫伤手 指。边倒边搅拌。由于国产 NaOH 不纯，可能会散发大量刺鼻气