课件：第十四章食品中有害物质的检测PPT课件.ppt

将蒸发皿放在通风柜，于65℃水浴上通风挥干，然后于冰盒上冷却2～3min后，准确加入1mL苯一乙腈混合液。用带橡皮头的滴管的管尖将残渣充分混合，若有苯的结晶析出，将蒸发皿从冰盒上取出，继续溶解、混合，晶体即消失，再用此滴管吸取上清液转移于2mL的具塞试管中。 三、测定 ①单向展开法 a．薄板制备：称取3g硅胶G，加2～3倍量的水，研磨1～2min呈糊状后，倒入涂布器推成5cm×20cm，厚度约0.25mm的薄层板3块。在空气中干燥15min，在100℃活化2h，取出，放干燥器中保存。 b．点样：在距薄层板下端3cm的基线上用微量注射器或血色素吸管滴加样液。一块板可滴加4个点，点距边缘和点间距为lcm，点直径约3mm，在同一板上滴加点的大小应一致，滴加时可用吹风机用冷风边吹边加。 滴加样式如下： 第一点：10μL AFTB1标准使用液(0.04μg／mL)。 第二点：20μL样液。 第三点：20μL样液+10μL 0.04μg／mL AFTBl标液。 第四点：20μL样液+10μL 0.2μg／mL AFTB1标液。 c．展开与观察：在展开槽内加10mL无水乙醚，预展12cm，取出挥干。再于另一展开槽内加10mL丙酮一三氯甲烷(8+92)，展开10～12cm，取出，在紫外光下观察结果。 d．确证试验: 第一点：10μL 0.04μg／mL AFTBl标准使用液。 第二点：20μL样液 于以上两点各加一小滴三氟乙酸盖于其上，反应5min后，用吹风机吹热风2min(板上温度不高于40℃)，再于薄层板上滴加以下两点。 第三点：10μL 0.04μg／mL AFTBl标准使用液。 第四点：20μL样液。 按上法展开并观察，样液是否产生与AFTB1标准点相同的衍生物。未加三氟乙酸的三、四两点，可依次作为样液与标准的衍生物空白对照。 e．稀释定量： 若样液中荧光强度比最低检出量强，则根据其强度估计，减少滴加微升数，或将样液稀释后再滴加不同微升数，直至样液点的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止。滴加式样如下： 第一点：l0μL AFTB1标准使用液(0.04μg／mL)。 第二点：根据情况滴加10μL样液。 第三点：根据情况滴加15μL样液。 第四点：根据情况滴加20μL样液。 f．结果计算： 式中：X 一 样品中AFTBl的含量，ug／kg； V1一加入苯一乙腈混合液的体积，mL； V2—出现最低荧光时滴加样液的体积，mL； D一样液的总稀释倍数； m1—加入苯一乙腈混合液溶解时相当样品的质量，g； 0.0004—AFTBl的最低检出限量，ug。 ②双向展开法 （滴加两点法） (1)点样：取薄层板三块，在距下端3cm基线上滴加AFTB1标液与样液。即在距左边缘0.8～1cm处各滴加10uL AFTB1(0.04ug／mL)标准液，在距左边缘2.8～3cm处各滴加20uL样液。然后在第二块板的样液点上加滴l0uL AFTBl(0.04ug／mL)标准液，在第三块板的样液点上加滴10uL AFTB1(0.2ug／mL)标准液。 (2)展开： a．横向展开：10mL无水乙醚，展至板端后，取出挥干。根据情况，可再重复l～2次。 b．纵向展开：以丙酮一三氯甲烷(8+92)展开至10～12cm为止。 (3)观察与评定结果： a．在紫外灯下观察第一、二块板，若第二块板的第二点在AFTB1标准点的相应处出现最低检出量，而第一板在与第二板的相同位置上未出现荧光，则样品中AFTBl含量5ug／kg. b．若第一块板在与第二块板的相同位置上出现荧光点，则将第一块板与第三块板比较，看第三块板上第二点与第一块板上第二点的相同位置上的荧光点是否与AFTB1标准点重叠，如果重叠，再进行确证试验。在具体测定中，三块板可以同时做，也可按顺序做。当第一块板出现阴性时，第三块板可以省略，如第一块板为阳性，则第二块板可省略，直接做第三块。 (4)确认试验：另取薄层板二块，于第四、五两板距左边缘0.8～1cm处，各滴加10u LATTB1(0.04ug／mL)标准液及一小滴三氟乙酸；在距左边缘2.8～3cm处，于第四板滴加20uL样液及一小滴三氟乙酸；于第五板滴加20uL样液、10uLAFTBl(0.04ug／mL)标准液及一小滴三氟乙酸，反应5min后，用热风吹2min(板上温度不高于40℃)。再用双向展开法展开后，观察样液是否产生与AFTB1标准点重叠的衍生物。观察时，可将第一板作为样液的衍生物